肺鳞状细胞癌的比较基因组杂交研究

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肺癌是最常见的恶性肿瘤,在中国和世界上其发病率和病死率都居各种恶性肿瘤之首.该实验采用比较基因组杂交等技术,探索与肺鳞癌相关的染色体改变.方法对32例肺鳞状细胞癌应用CGH检测染色体DNA拷贝数的改变并结合临床病理学资料进行分析.根据CGH提示的结果,应用差异PCR、RT-PCR、免疫组化技术,对高频扩增染色体区带中的候选靶基因进行DNA、RNA和蛋白质水平的研究分析.结果32例肿瘤样本中,非随机染色体DNA拷贝数的增加和减少近似,分别是5.7±2.2和5.2±2.3.常见的染色体扩增区域有:3q(23/32),11q13q(12/32),5p(11/32),12p(9/32)和8q(8/32).常见的染色体缺失区有:1p32-ter(17/32),3p(15/32),17p(13/32),9p(13/32),21q(10/32),19(9/32)等.在发生3号染色体短臂缺失的12例患者中同时存在整个3号染色体长臂或者部分的扩增.对染色体11q13内的CCND1和EMS1研究发现,8例CCND1扩增(25﹪,8/32),其中6例发生在有11q13扩增病例中(50﹪,6/12).EMS1扩增发生在7个病例中,其中5例是11q13扩增病例(41.6﹪,5/12).有4例发生CCND1和EMS1的共扩增,均为11q13扩增病例(33.3﹪,4/12).RT-PCR结果显示,CCND1mRNA表达肿瘤组织高于癌旁有6例,其中有4个病例同时存在CCND1拷贝数增加.EMS1 mRAN表达在肿瘤和癌旁组织中无差异.免疫组化结果显示,有7例CyclinD1高表达的病例(21.87﹪,7/32),其中有3例的CCND1 mRNA在肿瘤中的表达也高于相应的癌旁组织.结论研究表明肺鳞癌发生了一系列染色体DNA拷贝数的改变,特别是3q,11q13q,5p,12p,8q的扩增和1p,3p,17p和9p的缺失.11q13和12p增加、1p32-ter和19号染色体的缺失是肺鳞癌的特征性改变.CCND1可能是11q13扩增中的一个重要靶基因,通过基因扩增导致了cyclin D1在mRNA和/或蛋白质水平上的过表达,可能是一种扩增依赖性癌基因参与肺SCC的发生发展.EMS1与CCND1有共扩增,但无mRNA过表达,可能对11q13持续扩增不起作用.CGH结果为寻找与肺SCC相关的癌基因和抑癌基因提供新的候选区.应对此进行更深入的分子生物学研究.
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