microRNA（miRNA）是一组不编码蛋白质的短序列RNA。研究预测，它调节着人类三分之一的基因。miRNA具有长度短、丰度低的特点，因此必须使用一套专门适合miRNA的克隆方法。国内比较有代表性的是中山大学屈良鹄教授设计的末端转移酶加长法和解放军医学院郑晓飞教授设计的逆转录加尾法。本实验在逆转录加尾法的基础上，对于LMW RNA的分离富集方法进行了改进。利用PEG的分子特点，改变其浓度与沉淀时间，成功地从总RNA中分离富集了LMW RNA。MicroRNA对于胚胎发育尤其是胚胎的早期发育有非常重要的意义。在线虫等生物中已经发现并鉴定了与胚胎发育及其细胞分化相关的miRNA。本文选取了45d，55d，90d的早期胚胎以及脐带血作为研究对象，从中克隆得到了8条短序列RNA。经过BLAST比对和二级结构分析，发现其中一条具有miRNA的结构特征，暂时命名为miR-X1。经过半定量PCR检测其可以真实表达，确认此序列为候选miRNA，但还需要经过Northernblot进一步确认其为miRNA。经过生物信息学分析，此序列位于人类基因组第4条染色体中p16.3印迹区的基因内含子中，附近没有已发现的miRNA，说明miR-X1可能为单独表达。邻近编码蛋白质基因中没有能够找到miR-X1的靶基因。通过半定量PCR法分析此miRNA在不同发育阶段中的表达情况，发现其在45d，55d的早期胚胎及其脐带血中高度表达，预测此miRNA可能与发育调节及细胞分化有关。为寻找与人类胚胎发育及其细胞分化的关键miRNA做出了一定贡献。