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本文以金花茶愈伤组织与体细胞胚为材料进行了以下研究:愈伤组织与体细胞胚增殖优化;悬浮细胞系建立与保持;光源或培养基成分对愈伤组织与体细胞胚生长与总儿茶素含量影响;DFR、LAR与PPO的表达与相关性分析。希望通过以上研究为离体生产金花茶儿茶素类物质等次生代谢物质提供物质基础与理论指导。主要结果如下:1金花茶愈伤组织与体细胞胚增殖优化以富含儿茶素的金花茶愈伤组织为材料,研究了装液量、接种量、与培养方式对其增殖的影响。结果表明:适宜的装液量与接种量为:0.5 g/45 mL;适宜的培养方式为:“固-液-固”。以旺盛生长的金花茶体细胞胚为材料,研究了碳源组合、脯氨酸添加量及培养方式对其增殖的影响。结果表明;适宜的碳源为:蔗糖40 g/L+山梨醇20 g/L;适宜的脯氨酸添加量为2g/L;适宜的装液量与接种量为:0.5或1.0 g/45mL;适宜的培养方式为“固-固-液”。2金花茶悬浮细胞系建立与保持采用组织培养及显微观察技术,以金花茶植株茎段、叶片、花药及离体培养的金花茶体细胞胚胎为试验材料,对松散型愈伤组织的获得及悬浮细胞系的建立进行了研究。结果表明:在黑暗条件下,以金花茶体细胞胚胎切块为外植体,在MS+KT 0.5 mg/L+NAA8.0 mg/L+硝酸银5mg/L+蔗糖30 g/L培养基上诱导出愈伤组织后,将其转接到该诱导培养基上连续培养3个月,最后从培养物中挑选状态良好的松散型愈伤组织在分别含有肌醇与硝酸银的两种培养基上交替培养,可以获得大量的金花茶松散型愈伤组织;方差分析表明:蔗糖添加量、肌醇添加量及硝酸银添加量均对金花茶悬浮培养液细胞密度有显著影响且后两者分别与光照条件存在相互作用;将松散型愈伤组织在分别添加100 mg/L肌醇与2.5 mg/L硝酸银的液体增殖培养基上交替培养,可以建立并保持金花茶悬浮细胞系。在液体交替培养过程中测定了不同培养时间下悬浮细胞的生长情况。结果表明:初代培养的适宜时间为20 d;再培养的适宜时间为10 d。3光源或培养基成分对金花茶愈伤组织与体细胞胚生长与总儿茶素含量的影响以富含儿茶素的金花茶愈伤组织及旺盛生长的金花茶体细胞胚为材料,研究了光源、激素、碳源及苯丙氨酸添加量对两者增殖与儿茶素含量的影响。结果表明:光源、6-BA、2,4-D、6-BA×2,4-D、碳源的种类、碳源的添加量、碳源种类×碳源添加量与苯丙氨酸添加量均对金花茶愈伤组织生长无显著影响且对其总儿茶素含量有极显著影响;光源、6-BA、碳源添加量、与苯丙氨酸添加量均对体细胞胚增殖存在显著影响;光源、6-BA、NAA、碳源种类、碳源添加量、碳源种类×碳源添加量与苯丙氨酸添加量均对体细胞胚总儿茶素存在显著影响;最适合金花茶总儿茶素离体生产的条件为:以愈伤组织为材料、以日光灯为光源且以MS+6-BA4.0 mg/L+2,4-D 0.6 mg/L+蔗糖 30 g/L+苯丙氨酸 0.6608 g/L 为培养基。4金花茶LAR基因克隆与生物信息学分析以富含儿茶素的金花茶愈伤组织为材料采用同源克隆及RACE技术对LAR基因进行了克隆。所获得的LAR序列经验证后采用一系列的工具对其生物信息学进行分析。结果表明:金花茶LAR为酸性、稳定的疏水蛋白、可能存在4各由内向外和3个由外向内的的跨膜螺旋、可能不具有信号肽。金花茶LAR二级结构以无规则卷曲、α-螺旋和延伸链组成且其所占的比例分别为 44.74%、28.07%和 27.19%。该蛋白中在 6、8、114、186、214、231、247这七个位点上可能存在丝氨酸磷酸化;在107、201和245这三个位点上可能存在苏氨酸磷酸化;在163和164这两个位点可能存在酪氨酸磷酸化。这些磷酸化位点中分值超过95%的有三个,分别为:186、107和164。金花茶LAR可能在细胞质中行使其功能。其隶属于NADB Rossmann超家族,具有NAD（P）结合保守结构域。金花茶LAR与茶树LAR高度相似且部分植物LAR基因有不同成员。5金花茶DFR、LAR与PPO基因的qPCR定量表达及相关性分析以富含儿茶素的金花茶愈伤组织为材料对不同光源、激素、碳源及苯丙氨酸处理30 d的愈伤组织中DFR表达量、LAR表达量、PPO表达量与总儿茶素含量的变化情况及四者两两之间的相关性进行了研究。结果表明:这四项检测项目均对以上处理有显著的响应;在以上各因素处理下,DFR与LAR的表达模式十分相似,其相关系数处在0.710-0.889之间;在不同碳源处理下,PPO表达量与总儿茶素含量的变化呈显著负相关关系,其相关系数为-0.696;在不同苯丙氨酸添加量处理下,DFR与LAR表达量变化均与总儿茶素含量变化呈显著正相关关系,其相关系数分别为0.786和0.564;适宜儿茶素离体生产的金花茶愈伤组织增殖配方为附加4 mg/L 6-BA、0.6 mg/L 2,4-D、30 g/L蔗糖与0.6608 g/L苯丙氨酸的MS固体培养基,其总儿茶素含量可达40.11 mg/g（干重）。以上研究表明:与茶树相似,在金花茶中DFR与LAR在儿茶素代谢过程中密切相关;PPO表达量升高导致金花茶儿茶素损失;添加适宜浓度的苯丙氨酸作为前体物质是提高愈伤组织中总儿茶素含量的有效措施。