人脑胶质瘤的增殖、凋亡与PTEN基因表达的关系研究

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目的 胶质瘤是恶性肿瘤中最难治的疾病之一,虽然采用了手术、放疗、化疗等综合治疗措施,患者的五年生存率仍然很低。细胞原癌基因的激活或抑癌基因的失活是肿瘤发生的重要环节。肿瘤的发生、发展以及转移与基因的异常有着密切的关系,当前的研究已证实,肿瘤的发生发展是一个多基因参与、多步骤演变的复杂过程,因此,胶质瘤本质上是一种基因异常疾病。 PTEN作为新近发现的抑癌基因,是迄今为止发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因。本研究旨在探讨抑癌基因PTEN在人脑胶质瘤组织中的基因和蛋白表达,并研究其表达与肿瘤恶性程度分级间的相关性,结合人脑胶质瘤细胞增殖凋亡情况,分析人脑胶质瘤中PTEN基因的表达对胶质瘤细胞凋亡的影响及二者之间的相关性,以进一步明确PTEN基因在胶质瘤发生发展过程中的意义,为进一步体内体外实验以及肿瘤的防治提供理论依据。 方法 选取50例经手术切除的新鲜胶质瘤标本,按WHO分级情况,分为高分化组与低分化组,以10例正常脑组织标本为对照组。采用RT-PCR方法,在转录水平,分析PTEN基因5、8、9三个外显子水平mRNA的表达缺失情况。应用免疫组化及Western Blot方法检测PTEN蛋白在不同级别胶质瘤组织中的表达情况,比较胶质瘤与正常脑组织中PTEN表达的差异,分析PTEN蛋白表达与胶质瘤恶性程度之间的关系。应用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测胶质瘤标本和正常脑组织的增殖指数(PI)、S期细胞比率(SPF)、DNA倍性和凋亡指数(AI)以评价肿瘤细胞的增殖和凋亡,分析胶质瘤的PI、SPF、DNA倍性、AI与肿瘤病理级别的关系,以评价PTEN表达水平对胶质
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