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神经胶质瘤是一种中枢神经系统的恶性肿瘤,发病率高,国内报告总的发病率约占颅内肿瘤的35.26%-60.96%,平均44.69%。对于恶性的胶质瘤目前尚无完全的治愈方法。随着分子生物学技术的飞速发展,研究人员发现胶质瘤发生发展与多种基因的异常表达密切相关。PTTG与Survivin基因同属于癌基因,它们的过度表达可促进胶质瘤的发生,发展及侵袭,但其中具体的机制尚不十分清楚。本研究首先应用免疫组化法验证了PTTG与Survivin基因在胶质瘤组织中的高表达,并明确了此二基因的表达与胶质瘤临床病理特征之间的关系,并进一步以体外培养的人胶质瘤细胞系U251细胞为对象,利用RNAi技术同时沉默其中PTTG与Survivin基因的表达,观察这两种基因被同时沉默后人胶质瘤细胞恶性生物学行为所发生的变化,并与单独沉默其中单个基因做对比,探讨双基因同时沉默可能存在的优越性及其机制所在。我们的研究结果显示:PTTG与Survivin在人脑胶质瘤中呈高表达状态,并与胶质瘤的病理分期、血管形成密切相关。所构建的双靶点RNAi表达质粒能够有效地转染胶质瘤细胞系并高效地同时沉默PTTG与Survivin基因,且沉默效果要好于靶定其中单个基因的RNAi表达质粒。RNAi双靶点沉默PTTG与Survivin基因后,明显地改变了U251细胞的恶性生物学行为,表现为降低的细胞增殖能力,细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡的增加,明显降低细胞迁移速度及侵袭能力,且此类改变的程度超过了单独沉默其中某个基因。在随后的研究中我们还发现,双靶点沉默PTTG与Survivin基因对促血管生成因子VEGF及以P53蛋白为中心的多种细胞周期调控蛋白(HDM2、P14ARF,P53)产生显著的影响,且影响的程度超过单独沉默PTTG或Survivin,提示双靶点沉默PTTG与Survivin的抗肿瘤细胞恶性生物学行为的优势可能存在于此。本研究提示:针对PTTG与Survivin基因表达产物的检测,将有助于我们对胶质瘤的恶性程度及侵袭性等做以辅助判断,指导胶质瘤的手术及进一步的治疗;与单靶点沉默相比,RNAi双靶点沉默PTTG与Survivin基因在抑制肿瘤细胞恶性生物学行为方面优势明显,这可能为胶质瘤的治疗提供新的策略。目前,国内外尚未发现构建双靶点siRNA表达载体沉默U251细胞的PTTG与Survivin基因的相关报道。