长链非编码RNAPVT1对人脑胶质母细胞瘤增殖能力的影响

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第一部分目的:探究人脑胶质母细胞瘤中lncRNA-PVT1与c-myc mRNA的表达情况及其二者之间的关系方法:手术中获取人脑胶质母细胞瘤组织标本及正常人脑胶质组织标本各5例。提取组织RNA,分别运用琼脂糖凝胶电泳及荧光实时定量PCR技术检测lncRNA-PVT1与c-myc mRNA在人脑胶质母细胞瘤组织标本及正常人脑胶质组织标本中的表达情况。结果:胶质母细胞瘤组织标本中lncRNA-PVT1有表达,正常人脑胶质组织标本中未检测出lncRNA-PVT1表达。c-myc mRNA在胶质母细胞瘤及正常脑胶质组织中均有表达,但在胶质母细胞瘤中表达明显升高。lncRNA-PVT1及c-mycmRNA两者的表达量无相关性。结论:lncRNA-PVT1在人脑胶质母细胞瘤中表达异常增多,在正常人脑胶质组织中不表达或表达极低。c-myc mRNA在胶质母细胞瘤及正常脑胶质组织中均有表达,且c-myc mRNA在胶质母细胞瘤中的表达明显高于其在正常脑胶质组织中的表达。lncRNA-PVT1及c-myc mRNA在胶质母细胞瘤中均存在表达异常增多,但其两者之前似乎并无相关关系。第二部分目的:探究lncRNA-PVT1对人脑胶质母细胞瘤增殖能力的影响方法:利用小干扰RNA(siRNA)技术降低U251细胞lncRNA-PVT1表达水平,将实验分为NC组(siNC-U251细胞)与Si组(siPVT1-U251细胞)。qPCR法检测两组lncRNA-PVT1及c-myc RNA表达水平,运用CCK8法、EdU法检测两组细胞增殖能力,运用流式细胞技术分析两组细胞周期。Western blot检测两组c-myc蛋白及CyclinD1蛋白表达水平。结果:lncRNA-PVT1表达水平Si组较NC组明显降低,而c-myc mRNA的表达水平Si组较NC组无明显差异。CCK8结果显示1天、2天、3天的细胞活力Si组较NC组明显降低。EdU结果显示细胞增殖能力,Si组较NC组明显降低。细胞周期显示Si组细胞阻滞于G1期。Western blot显示Si组较NC组c-myc蛋白及CyclinD1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:转染siRNA后,人脑胶质母细胞中的lncRNA-PVT1表达水平降低,说明转染成功。c-myc mRNA水平并无明显改变,说明lncRNA-PVT1及c-myc mRNA在胶质母细胞瘤中并无相关关系。lncRNA-PVT1对c-myc mRNA并无影响。lncRNA-PVT1对于人脑胶质母细胞增殖具有促进作用,能够干扰人脑胶质母细胞周期的进程,lncRNA-PVT1的表达减少使人脑胶质母细胞停滞在G1期,阻碍细胞进入S期。lncRNA-PVT1可能通过c-myc,CyclinD1等影响人脑胶质母细胞增殖能力,干扰周期进程。
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