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目的:观察补体C3在糜酶促进肾间质纤维化中的作用。方法:第一部分:C3基因敲除对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)小鼠的影响。建立UUO小鼠模型,将12只野生型C57BL/6小鼠随机分为WTcontrol组和WTuuo组,将12只C3基因敲除(C3 gene knockout,C3KO)的C57BL/6小鼠随机分为C3KOcontrol组和C3KOuuo组。第二部分:糜蛋白酶抑制剂chymostatin对UUO小鼠的影响。将18只野生型C57BL/6小鼠随机分为WTcontrol组、WTuuo组和WTuuo+chymostatin组。其中WTuuo+chymostatin组在术后第1天至第14天腹腔注射10mg/Kg的chymostatin。所有小鼠均在第14天处死,取术侧肾组织,用Masson染色法观察肾间质纤维化程度;免疫组化对C3、胰蛋白酶(tryptase)、血管紧张素II(angiotensin II,Ang II)、转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase9,MMP9)进行定位及半定量检测;免疫荧光检测chymase水平;糜酶活性检测试剂盒检测肾组织chymase活性;ELISA检测Ang II、C3裂解片段C3a、MMP9的水平;Q-PCR检测肾素(renin)m RNA的变化;WB检测chymase、renin、TGF-β1的变化。结果:第一部分:与WTcontrol组小鼠相比,WTuuo组出现明显肾小管损伤(P<0.001)、肾间质纤维化(P<0.001),C3、C3a明显增加(P<0.001),肥大细胞、chymase明显增加(P<0.001),renin、Ang II明显增加(P<0.001),TGF-β1明显增加(P<0.001),MMP9明显增加(P<0.01);与C3KOcontrol组小鼠相比,C3KOuuo组出现明显肾小管损伤(P<0.001)、肾间质纤维化(P<0.001),肥大细胞、chymase增加(P<0.001)、renin、Ang II明显增加(P<0.001),TGF-β1明显增加(P<0.01);与WTuuo组小鼠相比,C3KOuuo组小鼠肾小管损伤明显减轻(P<0.001)、肾间质纤维化明显减轻(P<0.001),肥大细胞浸润、chymase释放减少(P<0.001),RAS组分renin减少(P<0.001)、Ang II水平减低(P<0.05),TGF-β1、MMP9明显减少(P<0.05)。第二部分:与WTcontrol组小鼠相比,WTuuo组出现明显肾小管损伤(P<0.001)、肾间质纤维化(P<0.001),chymase活性明显增加(P<0.001),Ang II明显增加(P<0.001),TGF-β1明显增加(P<0.001),MMP9明显增加(P<0.01);与WTuuo组小鼠相比,WTuuo+chymostatin组肾小管损伤明显减轻(P<0.001)、肾间质纤维化明显减轻(P<0.001),chymase活性明显下降(P<0.001),Ang II减少(P<0.01)、TGF-β1减少(P<0.001)、MMP9减少(P<0.05)。结论:C3/C3a可能通过参与募集、活化肥大细胞使其释放糜酶促进肾间质纤维化;肥大细胞与C3/C3a在肾间质纤维化中可能互相作用并形成放大效应。