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禽白血病是由禽白血病病毒和肉瘤病毒群中的病毒引起的禽类多种肿瘤性疾病的总称。J亚群禽白血病是由J亚群禽白血病病毒引起的一种肿瘤性疾病。该亚群有宿主范围广泛、感染率高、传播速度快、致死率高等特点,给养鸡业造成了严重的危害和巨大的经济损失。
随着ALV-J的传播和病原变异,其病理表现日趋复杂。除了最开始报道的以骨髓细胞瘤为主的表现形式之外,越来越多的ALV-J表现为血管瘤/血管肉瘤、纤维瘤/纤维肉瘤、淋巴瘤、神经胶质瘤等不同的形式。近年来,美国农业部禽病与肿瘤学研究室等研究单位相继报道由于病原变异、重组和品系间基因差异,ALV-J可以淋巴细胞性肿瘤为主要病变、而并不表现为骨髓细胞瘤。我国ALV-J的流行形势也日趋严峻,但至今尚未见国内以淋巴样肿瘤为ALV-J主要病变的研究报道。
本研究以广东省部分清远麻鸡种鸡和肉鸡场的肿瘤病鸡为研究对象,在流行病学调查、临床症状和尸体剖检观察、病理组织学研究的基础上,采用PCR检测、鸡胚培养和鸡成纤维细胞培养等方法对其病原进行了分离和鉴定,并用兔抗鸡ALV-J抗体对肿瘤组织中的病原进行了定性和定位检测。为进一步探讨肿瘤细胞的性质、起源和发病机制,本研究还采用免疫组织化学方法,选择多种淋巴细胞和髓细胞免疫标记,对肿瘤细胞进行了免疫表型研究。
流行病学调查选用禽白血病ELISA抗原诊断试剂盒,抽取种母鸡1180只、种公鸡108只,ALV阳性检出率33.4%。发病鸡大多20周龄以上,临床表现主要为明显消瘦,精神不振,喜卧,鸡冠苍白、皱缩,采食量减少、产蛋量下降,呈营养不良和贫血。剖检病变主要为肝、脾、肾和肺等内脏组织有不同程度的肿大,出现大小不等的灰白色结节,骨髓病变不明显。部分鸡内脏和颈部皮下等部位可见暗红色肿瘤结节。
PCR检测32例疑似ALV病鸡的肝脏病料,有25例检测到545bp特异基因片段,ALV-J阳性或强阳性,感染率78.13%,证实ALV-J是这些鸡场的主要肿瘤性疾病病原。取上述病料接种鸡成纤维细胞培养,电镜观察到病毒粒子呈圆形,直径约100nm,粒子外层囊膜表面有球状纤突。此外,PCR检测结果还发现,上述鸡场还存在鸡马立克氏病、鸡贫血病、网状内皮增生症等肿瘤疾病的混合感染。
选择PCR检测单纯为ALV-J阳性的病鸡进行病理组织学观察发现,除血管瘤型的肿瘤病变外,大部分肿瘤组织均呈典型的淋巴细胞样肿瘤形态。实质器官中见多量淋巴样瘤细胞呈灶状或弥漫状浸润,瘤细胞圆形,胞浆嗜碱性,核大,染色质密集,病理性核分裂相多见。未见骨髓细胞性肿瘤表现。
免疫表型研究结果表明ALV-J引起的淋巴样肿瘤细胞呈髓细胞抗原和淋巴细胞抗原的混合表达,以前髓细胞系抗原表达为主,同时伴前淋巴细胞系抗原的弱阳性表达。结果提示骨髓为肿瘤的原发部位,肿瘤细胞可能起源于造血干细胞。
研究结果证明,在广东省这些清远麻鸡场发生的肿瘤疾病中,以ALV-J为主要病原;而其病理表现,则以淋巴样肿瘤细胞为主要形式。由于ALV-J本身缺乏肿瘤基因,其致瘤机理主要是由病毒通过插入细胞基因组激活细胞的原癌基而产生致肿瘤作用。因此本研究结果提示,由于ALV-J抗原的不断进化、重组,加之不同地方品系鸡群的基因差异,造成了ALV-J在病理表现上的多样性和复杂性。