慢性神经病理性疼痛是由于外周或中枢神经损伤而导致的痛觉过敏或痛觉异常。研究表明,痛觉通路上的多种胶质细胞等非神经细胞广泛地参与了病理性疼痛发生发展过程。P2Y12受体是嘌呤能受体家族中的一种Gi类型的代谢型G蛋白偶联受体,表达于小胶质细胞、卫星胶质细胞等与痛觉通路密切相关的非神经细胞上。早年人们已经发现,在P2Y12受体全身敲除的神经痛模型小鼠,其机械痛过敏现象显著弱于对照的野生型小鼠,提示P2Y12受体在慢性神经病理性疼痛的发生发展中发挥了重要作用。但P2Y12受体介导神经痛的细胞信号机制目前还不清楚。在中枢神经系统,P2Y12受体高表达于小胶质细胞。已有大量研究表明,小胶质细胞在促进神经痛形成过程中发挥重要作用。在外周神经节部位,P2Y12也表达于卫星胶质细胞。卫星胶质细胞紧密包绕神经元胞体,对神经元胞体的微环境起决定性作用,参与调控痛觉信号传导。那么,P2Y12具体在哪类细胞中发挥功能,介导神经痛的形成呢?本研究主要运用P2Y12-flox转基因小鼠,以L4脊神经切断术（SNT）作为慢性神经病理性疼痛的模型,通过观察P2Y12受体分别在全身敲除、小胶质细胞或卫星胶质细胞特异敲除后的小鼠痛行为表现,模型后胶质细胞激活,P2Y12表达谱变化等手段,探讨P2Y12受体介导神经痛的细胞信号机制。实验结果表明:1)使用CX3CR1-Cre与P2Y12-flox小鼠杂交得到的P2Y12flox/flox;CX3CR1Cre/+小鼠可特异性敲除小胶质细胞的P2Y12受体。但该小鼠在SNT后的痛行为表现和WT小鼠无差异,术后7天的脊髓背角小胶质细胞激活与WT也无差异。这说明小胶质细胞的P2Y12受体不是神经痛形成所必需的。2)使用Dhh-Cre与P2Y12-flox小鼠杂交得到的P2Y12flox/flox;Dhh Cre/+小鼠可特异性敲除背根神经节（DRG）的卫星胶质细胞P2Y12受体。该小鼠在术后第三天的痛阈较WT小鼠显著的高,但在此后的5-14天痛阈下降到与WT小鼠相当的水平。这提示卫星胶质细胞的P2Y12受体参与了早期的神经痛形成过程,但仍然有其他细胞来源的P2Y12受体在此后发挥作用。3)通过探查P2Y12受体在SNT后的表达情况,我们发现原本不表达该受体的DRG巨噬细胞在术后部分细胞开始表达P2Y12受体,提示来自这些细胞的P2Y12受体可能也在神经痛形成过程发挥作用。此外,敲除卫星胶质细胞的P2Y12受体也不影响SNT后脊髓背角小胶质细胞的激活。以上结果提示,卫星胶质细胞P2Y12受体在慢性神经病理性疼痛的初期发挥关键作用,而来自巨噬细胞的P2Y12表达激活可能进一步促进了神经痛的形成。