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花椒是一种常见的调味品,其化学成分主要有挥发油、生物碱、酰胺、木脂素、香豆素、黄酮类物质、脂肪酸等。花椒产地不同,花椒中的各种组分及其含量也不同。花椒挥发油由于受气候条件、土壤性质、产地、品种等诸多因素的影响,极少出现有完全相同的成分组成和相同含量的分析结果。本论文比较了水蒸汽蒸馏法、溶剂萃取法和同时蒸馏萃取法三种挥发油提取方法,将GC-MS指纹图谱技术应用于花椒挥发油的分析,建立了花椒挥发油指纹图谱,并对花椒挥发油的成分进行了分析,采用GC法测定了花椒挥发油中柠檬烯和芳樟醇的含量。研究结果如下:(1)比较了水蒸汽蒸馏法、溶剂萃取法和同时蒸馏萃取法,得到同时蒸馏萃取法提取花椒挥发油效果最好,并且确定了提取条件为:将干燥花椒果皮粉碎,过40目,采用无水乙醚为提取溶剂,超声波处理5min,同时蒸馏萃取提取3h。(2)对花椒挥发油指纹图谱进行研究,建立了花椒挥发油指纹图谱分析条件。气相色谱条件:石英毛细管柱RtX-Wax(0.25μm×30m×0.32mm,100%聚乙二醇固定相);程序升温,柱温40℃,保持1min,以3-C/min升至65℃,再以10℃/min升至90℃,然后以1.5℃/min升至120-C,最后以10℃/min升至230℃,保持5min分流比25:1;载气为高纯He,柱前压为50kPa,流速为1.0mL/min;进样口温度250℃;接口温度250℃;溶剂延迟时间2.5 min。质谱条件:El电子源,离子源温度220℃,扫描范围35-450m/z,标准图库NIST05。(3)对四川、重庆、云南、贵州、甘肃地区青花椒和红花椒样品挥发油进行了GC-MS分析,分别建立了青花椒挥发油指纹图谱和红花椒挥发油指纹图谱。青花椒挥发油指纹图谱有20个共有峰,红花椒挥发油指纹图谱有11个共有峰。青花椒挥发油主成分经聚类分析后,16批样品聚为4类,这4类青花椒产地分别是四川洪雅藤椒基地、云南昭通、重庆、四川金阳。红花椒挥发油主成分经聚类分析后,16批样品也聚为4类,分别是甘肃天水市秦安县郭家镇大油椒、甘肃天水市秦安县和四川阿坝州金川县、四川汶川县、四川汉源和凉山州。(4)32批花椒样品中,青花椒挥发油含量变化范围为9.62 g/100g~13.61g/100g,而红花椒挥发油含量变化范围为6.79g/100g~12.20g/100g,青花椒挥发油含量与红花椒挥发油含量之间存在极显著性差异(P≤0.01)。青花椒挥发油中,共有峰占总峰面积的百分比平均为88.39%,其中萜烯类平均峰面积百分比为41.95%,醇类56.06%,酮类1.99%。红花椒共有峰占总峰面积的百分比平均为75.90%,其中萜烯类平均峰面积百分比为52.59%,醇类34.50%,酯类12.91%。(5)采用GC法建立了柠檬烯和芳樟醇的含量测定方法,得到柠檬烯回归方程Y=306213X-8925.9(r=0.9997,n=7),线性范围0.4765mg/mL-9.5300mg/mL,芳樟醇回归方程Y=225875X+25659(r=0.9994,n=8),线性范围1.0535 mg/mL-23.1300 mg/mL。对四川、重庆、云南、贵州、甘肃地区花椒样品挥发油中的柠檬烯和芳樟醇含量进行测定,结果表明,柠檬烯含量从2.9401 mg/g~29.1082 mg/g不等,青花椒挥发油中柠檬烯含量均值为12.8883mg/g,红花椒挥发油中柠檬烯含量均值为14.0397 mg/g,二者间无显著性差异;芳樟醇含量从1.5702 mg/g-114.2165 mg/g不等,青花椒挥发油中芳樟醇含量均值为红花椒的9.13倍,分别为72.5295 mg/g和7.9406 mg/g,且青花椒挥发油中芳樟醇含量与红花椒之间存在极显著性差异(P≤0.01)。32批花椒挥发油中,柠檬烯含量与芳樟醇含量间无显著相关性。花椒挥发油指纹图谱的研究,使花椒挥发油的研究从单一成分定性定量分析,转向有效成分群体分析,更加科学、准确地反映了花椒的内在品质。因此,花椒挥发油指纹图谱的建立,可以作为花椒的鉴别和质量控制模式,并为中药标准指纹图谱的建立提供基础,这既有创新性又有现实意义。本论文为国家自然科学基金项目“基于近红外光谱的花椒品质快速检测机理及模型优化方法研究”(30671198)和重庆市重点自然科学基金项目“花椒和生姜中功效成分组成和功能性质及定量检测的研究”(CSTC2006BA1007)的部分研究内容。