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目的:本课题立足中医基础理论,结合现代医学研究,旨在通过实验研究,观察补肾健脾中药对未成年雌性大鼠血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平、脏器湿重及子宫卵巢上雌激素受体(ER)的表达情况的影响,探讨补肾健脾中药治疗青春期功血的作用机理,从而为青春期功血的治疗提供更为开阔的科研思路和临床治疗依据。 方法:以25～28日龄的Wistar未成年雌性大鼠为研究对象,以宫血停颗粒、己烯雌酚片和中药补肾健脾方为实验用药。将72只未成年雌性大鼠随机分为6组,即空白对照组、己烯雌酚组、宫血停组、补肾健脾方高剂量组(简称中药高剂量组)、补肾健脾方中剂量组(简称中药中剂量组)、补肾健脾方低剂量组(简称中药低剂量组),每组12只,分笼喂养,每日定时灌胃给药1次。中药高、中、低剂量组给药剂量分别为30,15,7.5g/kg(以生药量计),分别相当于临床剂量的6.7倍、3.35倍、1.68倍。宫血停组与已烯雌酚组分别给予宫血停、己烯雌酚,均按临床剂量的6.7倍制成,用药剂量分别为8g/kg、0.067mg/kg。各组用药体积均为20ml/kg,空白对照组给予等量生理盐水,均连续给药22天。自第17日起取大鼠阴道脱落细胞涂片观察大鼠性周期的变化。给药22天后,经阴道细胞涂片观察并挑选处于动情期的大鼠,间隔24h处死,进行指标测定。放免法检测大鼠血清E2、P、FSH、LH的含量;取大鼠子宫、卵巢称重,并换算为脏器系数;并用免疫组化法观察子宫卵巢上雌激素受体的表达情况。 结果:(1)中药各剂量组同空白对照组相比,大鼠出现规律的动情周期。(2)中药高、中、低剂量组和宫血停组均能明显提高未成年大鼠FSH、LH水平,与空白对照组比较,差别有统计学意义。己烯雌酚组大鼠血清E2水平明显升高,中药各剂量组E2水平较空白对照组升高,差别有统计学意义。中药各剂量组水平有明显升高趋势,其中中药中剂量组较己烯雌酚组、空白对照组比,差别有统计学意义(P<0.05)。(3)中药高、中、低剂量组与己烯雌酚组均能促进未成年大鼠子宫和卵巢的发育,与空白对照组比,差别有统计学意义(P<0.05);中药各剂量组脏器系数较己烯雌酚组比,有升高趋势,但无统计学意义。(4)中药高、中、低剂量组卵巢雌激素受体表达较空白对照组有升高趋势,但差别无统计学意义(P>0.05);中药各剂量组子宫雌激素受体表达明显增加,其中中药高、低剂量组子宫腺体表达较空白对照组差别有显著的统计学意义(P<0.05),中药低剂量组子宫内膜表达较空白对照组差别有统计学意义(P<0.05)。 结论:中药补肾健脾方能明显改善未成年大鼠垂体促性腺激素与卵巢性激素的分泌;促进未成年大鼠子宫、卵巢的发育;且该方有增加子宫与卵巢上雌激素受体的表达的作用,说明补肾健脾方有促进未成年大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴成熟的作用。青春期功血的发病机制主要是下丘脑-垂体-卵巢轴的调节功能不成熟,本实验探讨了补肾健脾方对未成年大鼠性腺轴的调节作用,为临床运用补肾健脾法治疗青春期功血提供了实验依据。