氧杂蒽衍生物pH和钯离子荧光探针的合成及应用

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作为一种重要的分析手段,荧光探针(荧光传感器)的检测对象不但包括生理活性小分子(ROS、NO和RNS等)、生物功能大分子(酶、蛋白和核酸等)及各类阴阳离子等物质,还包括酸碱度、温度、湿度和粘度等生理条件。氧杂蒽类荧光染料为常用的荧光探针母体分子,具有光稳定性好、摩尔消光系数大和量子产率高等诸多优点,使得以其为母体设计的荧光探针被广泛应用于食品安全、医疗诊断和环境污染检测等各个领域。氧杂蒽类荧光染料一般包括三类,分别为罗丹明类荧光染料、荧光素类荧光染料和Rhodafluor荧光染料。鉴于氧杂蒽类荧光探针的优势,结合pH与钯离子检测的重要生理学或环境学意义,本文分别以罗丹明B和萘荧光素为母体设计合成了两个分别用于pH和钯离子的高灵敏、专一性检测的荧光探针。pH荧光探针RBN。基于质子化荧光淬灭和荧光共振能量转移(FRET)原理,将萘二甲酰亚胺与罗丹明B通过连接臂相连,设计合成了可实现宽范围线性检测pH的荧光探针RBN。在pH为5.25-8.00的范围内,RBN中的萘二甲酰亚胺的一个氧原子、连接臂中的亚氨基的氮原子及罗丹明B酯环上的氧原子之间可形成氢键,导致萘二甲酰亚胺的荧光淬灭,从而实现pH的单波长(I540)检测。在pH为4.02-4.60的范围内,罗丹明B开环,萘二甲酰亚胺与罗丹明B发生FRET效应,实现pH的比率(I577/I540)检测。竞争实验表明该探针对pH的检测不受体系中常见阴阳离子的干扰。RBN细胞毒性较低,可用于区分正常细胞与癌细胞。与已报道的pH荧光探针相比,RBN水溶性好、选择性强和灵敏度高,克服了单个荧光团用于pH检测的弊端,为该类探针的开发和应用提供了借鉴。钯离子探针M-PD。以萘荧光素为母体,丙炔基团为反应基团,设计合成了近红外钯离子荧光探针M-PD。钯离子催化M-PD脱丙炔基反应,使其在668 nm处的荧光增强,从而实现钯离子的近红外荧光检测。该探针水溶性好,专一性强(不受体系中其他离子的干扰)、检测线性范围广(1-70μM),检测限低(10.8nM),且细胞毒性小,可用于细胞内钯离子的荧光成像,为钯离子的环境毒理学研究提供了重要的手段。
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