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目的:1.观察穴位贴敷（Acupoint Sticking Therapy,AST）治疗哮喘（Bronchial asthma,BA）气道炎症的临床疗效以及分析BA患者外周血中Ⅱ型固有淋巴细胞（Type Ⅱ innate lymphoid cells,ILC2s）与临床资料的相关性;2.通过高效液相色谱法（High performance Liquid Chromatography,HPLC）、超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF-MS）以及网络药理学分析AST药物成分和预测作用靶点,以及动物实验验证,探讨AST治疗BA的作用机制。方法:1.本研究共纳入70例来源于2020-2021年江苏省中医院针灸康复科特色疗法中心和呼吸科就诊且确诊为BA的患者,将患者分为布地奈德福莫特罗组（简称信必可组）35例和信必可+AST组35例,信必可组给予布地奈德福莫特罗粉吸入粉雾剂治疗,信必可+AST组在布地奈德福莫特罗粉吸入粉雾剂治疗基础上加用AST治疗,总疗程6周,治疗结束时,信必可组脱落1例,信必可+AST组脱落病例2例。（1）在治疗前和治疗结束时,比较信必可组34例和信必可+AST组33例BA患者肺功能相关指标以及哮喘控制测试表（Asthma Control Test,ACT）情况以评价AST治疗BA的临床疗效;（2）按照患者意愿将2021年BA患者分为信必可组14例和信必可+AST组14例,采用流式细胞术分析外周血ILC2s%水平,①分析治疗前BA患者外周血ILC2s%与临床资料的相关性;②在治疗前和治疗结束时,比较两组患者外周血嗜酸性粒细胞（Eosinophil,EOS）绝对值、呼出气一氧化氮（Fractional exhaled nitric oxide,FeNO）、肺功能相关指标、BA控制水平、BA控制问卷评分（Asthma Control Questionnaire-7,ACQ-7）以及外周血 ILC2s%的水平;2.运用中药系统药理学数据库与分析平台（Traditional Chinese Medicine Systems Pha rmacology Data base and Analysis Platform,TCMSP）检索 AST 药物组方中最关键的五味药:白芥子、延胡索、甘遂、细辛和生姜,选取其化学成分,完成自建库,采用HPLC鉴定AST核心组成药物中的化学成分作为质量控制,运用UPLC-Q-TOF-MS检测AST药物中的化学成分,并在自建库中进行分析;利用TCMSP和Swiss Target Prediction对得到的AST药物化学成分进行作用靶点的筛选;在GeneCards中收集BA气道炎症、气道高反应、气道重塑的靶点;将药物作用靶点与BA机制靶点交集得到核心靶点,运用STRING和DAVID将核心靶点进行PPI、GO以及KEGG信号通路分析,Cytoscape3.7.2软件绘制“中药—化学成分—靶点—疾病”网络并进行可视化分析,综上以推测AST治疗BA可能的作用机制和信号通路;3.建立屋尘螨（House dust mite,HDM）诱导的BA小鼠模型,采用肺组织病理、肺功能检测、免疫印迹法（Western blot,WB）和流式细胞术（Flow cytometry）等方法验证AST治疗BA的作用机制和信号通路。结果:1.（1）对比信必可组34例和信必可+AST组33例的临床疗效发现:①在治疗前后,分别对两组进行组内对比,1)信必可组BA患者ACT评分改善（P＜0.05）,但在肺功能的几个检测指标方面没有明显改善（P＞0.05）;2)信必可+AST组BA患者BA患者ACT评分明显改善（P＜0.001）,同时在FEV1%（P＜0.05）和MMEF75/25（P＜0.05）两个肺功能检测指标方面具有统计学差异的改善;②在治疗结束时进行两组间对比,发现AST能在信必可治疗基础上改善BA患者肺功能中FVC%指标（P＜0.05）,以及改善ACT评分（P＜0.01）,具有统计学意义;（2）对比信必可组14例和信必可+AST组14例相关资料发现:①外周血ILC2s%与外周血EOS绝对值（r=-0.706,P＜0.0 01）和FeNO（r=-0.971,P＜0.001）两者之间存在正相关性;②在治疗前后,分别对两组进行组内对比,发现1)信必可组的BA患者FeNO水平下降（P＜0.05）,ACQ-7评分改善（P＜0.01）以及外周血中ILC2s%（P＜0.01）水平都呈下降趋势,但在BA控制水平和肺功能方面没有明显改善（P＞0.05）;2)信必可+AST组的BA患者控制水平提高（P＜0.05）、FeNO水平（P＜0.05）下降,ACQ-7评分改善（P＜0.05）以及外周血中ILC2s%（P＜0.01）水平都呈下降趋势;③对比治疗结束时两组间,信必可+AST组在BA控制水平方面优于信必可组（P＜0.05）,但在其他临床指标和外周血ILC2s%方面,均无显著性差异（P＞0.05）;2.HPLC分析得到:延胡索乙素、芥子碱硫氰酸盐、细辛脂素、6-姜酚以及大戟二烯醇可作为AST药物质量控制的主要化学成分;UPLC-Q-TOF-MS结合自建库分析得到AST药物组成中的41个化学成分,药物与BA机制的作用靶点筛选得到162个潜在靶点,根据Degree值选择前53个为关键靶点。“中药—化学成分—靶点—疾病”网络分析得到清风藤碱、芥子酸、二氢辣椒素、6-姜酚等关键化学成分以及SRC、PIK3CA等关键靶点;KEGG分析发现AST治疗BA的信号通路可能主要围绕PI3K-AKT、ErbB、Sphingolipid等;3.（1）肺功能方面:对比正常组小鼠,模型组小鼠的Penh水平明显升高,具有统计学差异（P＜0.001）,AST组小鼠的Penh无明显统计学差异（P＞0.05）;对比模型组小鼠,AST组小鼠的Penh水平明显下降,具有统计学差异（P＜0.01）;（2）相关蛋白表达方面:对比正常组小鼠,模型组小鼠肺组织中p-AKT和PI3K蛋白表达显著升高,具有统计学意义（P＜0.001）,PTEN蛋白表达显著下调,具有统计学意义（P＜0.001）,AKT蛋白表达无明显差异（P＞0.05）;对比模型组,AST组小鼠肺组织中p-AKT和PI3K蛋白表达显著下调,具有统计学意义（P＜0.01）,PTEN蛋白表达显著升高,具有统计学意义（P＜0.001）,AKT蛋白表达无明显差异（P＞0.05）;（3）ILC2s方面:对比正常组,模型组小鼠肺组织中ILC2s水平显著升高,具有统计学意义（P＜0.001）;对比模型组,AST组小鼠肺组织中ILC2s水平明显下降,具有统计学意义（P＜0.01）。结论:1.（1）BA患者外周血ILC2s%水平与FeNO、外周血EOS绝对值存在正相关性,提示其ILC2s与BA气道炎症之间存在密切关系;（2）AST联合信必可治疗和单纯信必可治疗都能有效改善BA患者FeNO、外周血ILC2s%以及ACQ-7评分;（3）AST联合信必可治疗在改善肺功能、提高ACT评分以及BA控制水平方面优于单纯信必可治疗;2.HPLC分析得到延胡索乙素、芥子碱硫氰酸盐、细辛脂素、6-姜酚以及大戟二烯醇可作为AST药物质量控制的主要化学成分;3.UPLC-Q-TOF-MS结合网络药理学发现清风藤碱、芥子酸、二氢辣椒素、6-姜酚等可能是AST治疗BA的药物关键化学成分,且主要来源于白芥子、甘遂和生姜;SRC、PIK3CA等可能是AST治疗BA的关键靶点;AST治疗BA的信号通路与PI3K-AKT的相关性最大;4.动物实验验证得到AST治疗BA的机制可能是通过下调PI3K-AKT信号通路,抑制ILC2s的分化产生,从而减轻气道炎症。