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研究背景与目的:缺血性脑卒中（Ischemic stroke,IS）多是由多种诱发因素导致的大脑中动脉及其侧支循环发生血管闭塞、狭窄或破裂,进而大脑各动脉血流受阻,血流异常导致脑部缺血缺氧,患者多表现为短暂性或永久性的神经功能损伤。IS占脑卒中病例总数的60%～80%,现已成为全世界成年人死亡的主要原因之一,严重影响了患者生命质量。到目前为止,临床医学界仍然缺乏能够减少缺血引起的神经损伤的有效方法。重组组织纤维蛋白溶酶原激活剂（Recombinant tissue plasmmogen activator,rt-PA）是目前我国国家药品监督管理局批准的唯一一种可以通过溶解血凝块使得血液恢复再灌注来治疗缺血性中风的有效治疗法。然而,由于治疗时间窗极为狭窄,仅为4.5小时,多数患者在缺血发作后无法在此时间窗内到达医院,因此其应用受到限制。以往的研究发现通过新生的血管可进一步改善脑组织缺血的供应,改善神经功能。为此,本研究主要基于血管新生的研究理念,从体内外实验以及临床患者等三个方面共同探讨协定方通脑饮对IS的治疗病理生理学机制。方法:第一部分为理论研究,分别通过中医学和现代医学,对中风的由来、病因、机制及治疗手段等进行回顾和流行病学研究。第二部分实验研究分为两部分,第一部分通脑饮（TND）对转基因斑马鱼胚胎血管新生的作用及机制:将购进的转基因斑马鱼进行适应性饲养后分组并给药处理,TND（3.5,7.0,14.0 mg/kg）和安慰剂（3.5 mg/kg）,一日两次,连续给药十四天。计算中药通脑饮（TND）在斑马鱼胚胎中的半致死浓度（LC50）和最大非致死浓度（MNLC）;进行VEGF受体抑制剂（VRI）诱导的斑马鱼特异性抑制剂试验;体外细胞活力测定;体外伤口愈合试验;管形成试验;药物治疗后斑马鱼胚胎中血管生成变化的评估等;第二部分通脑饮主要活性成分天麻素（GSTD）通过调节miR-21影响HUVECs功能,诱导血管新生的机制:EdU和MTT方法检测EdU标记率与HUVECs细胞增殖抑制率,荧光实时定量RT-PCR检测HUVECs中miR-21的表达,划痕试验与成管试验检测HUVECs的迁移和成管能力,蛋白免疫印迹法检测p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt等蛋白表达水平。第三部分选取80例急性脑梗死患者为研究对象,根据治疗方法不同将80例急性脑梗死患者分为对照组（n=40）和试验组（n=40）。对照组患者给予常规基础治疗联合氯吡格雷干预,试验组在对照组的基础上给予通脑饮干预。观察两组患者治疗前后中医证候积分、血清HIF-1α、VEGF表达情况、血小板相关参数、神经功能缺损程度、日常生活能力、临床疗效以及不良反应发生情况。结果:第二部分TND可改善VRI诱导的HUVECs凋亡,保护HUVECs细胞活力,促进HUVECs增殖,促进HUVECs伤口愈合,显著促进HUVECs的血管形成（P＜0.05）,改善了斑马鱼胚胎中VRI诱导的ISVs损伤,扩大了 SIVs上的血管并促进VRI诱导的斑马鱼胚胎中CtAs的恢复,VEGFR2下游信号分子的抑制剂可阻断TND在VRI诱导的斑马鱼胚胎中的促血管生成活性。与对照组相比,VEGF组、GSTD-10μM组和GSTD-25μM组的细胞增殖水平明显升高（P＜0.05）,并且GSTD呈浓度依赖性;VEGF组、GSTD-10μM组的管形成和细胞迁移能力较GSTD-25μM组明显升高,MMP-2和MMP-9表达水平明显升高（P＜0.05）;VEGF和GSTD均显著上调了 HUVECs中miR-21的表达,并且GSTD-25μM组的miR-21显著高于GSTD-10μM组（P＜0.05）;与对照组相比,VEGF和GSTD组的p-PI3K和p-Akt蛋白水平明显升高,p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt 比例明显更高。与GSTD+NC抑制剂组相比,GSTD+miR-21抑制剂组的p-Akt和p-PI3K蛋白水平明显降低,p-Akt/Akt和p-PI3K/PI3K 比值明显降低（P＜0.05）。第三部分两组治疗前中医证候积分比较（P＞0.05）,两组治疗后较治疗前中医证候积分明显降低,且试验组中医证候积分低于对照组（P＜0.05）;两组治疗前血清VEGF、HIF-1α表达水平比较（P＞0.05）,两组治疗后血清VEGF表达水平较治疗前明显升高,HIF-1α表达水平较治疗前明显降低,且试验组血清VEGF表达水平高于对照组,HIF-1α表达水平低于对照组（P＜0.05）;两组治疗前血小板相关参数PDW、MPV、P-LCR情况比较（P＞0.05）,两组患者治疗后血小板相关参数PDW、MPV、P-LCR情况较治疗前明显降低,且试验组血小板相关参数PDW、MPV、P-LCR低于对照组（P＜0.05）;两组患者治疗前NIHSS和Barthel评分比较（P＞0.05）,两组患者治疗后NIHSS评分较治疗前明显降低,Barthel指数明显升高,且试验组患者NIHSS评分低于对照组,Barthel指数高于对照组（P＜0.05）;治疗后试验组患者治疗总有效率为95.00%高于对照组总有效率80.00%（P＜0.05）;治疗后试验组患者皮肤过敏、胃肠道反应、恶心以及血压升高等不良反应总发生率为7.50%稍低于对照组患者不良反应总发生率15.00%,但组间对比（P＞0.05）。结论:1.TND通过激活VEGFR2、PI3K/Akt、RafMEK/ERK依赖性信号通路促进HUVECs中的细胞增殖、迁移和血管形成。2.TND主要活性成分天麻素可通过激活PI3K/Akt信号通路增加HUVECs中miR-21的表达,改善细胞增殖、迁移和管状形成,诱导新生血管形成。3.TND治疗急性脑梗死患者的临床疗效确切,可有效改善患者神经功能和血清HIF-1α、VEGF的表达,且安全性较高,值得临床推广及广泛应用。