【摘 要】
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研究目的:该研究在细胞水平观察免疫抑制剂环孢素(CsA)对肾素-血管紧张素系统(RAS)的影响及血管紧张素受体拮抗剂氯沙坦(Losartan)对CsA诱导的细胞增生及细胞外基质形成的干
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研究目的:该研究在细胞水平观察免疫抑制剂环孢素(CsA)对肾素-血管紧张素系统(RAS)的影响及血管紧张素受体拮抗剂氯沙坦(Losartan)对CsA诱导的细胞增生及细胞外基质形成的干预作用,阐明RAS在CsA肾毒性中的作用,为临床应用血管紧张素受体拮抗剂(ARBs)防治CsA肾毒性提供理论依据.研究方法:实验采用体外培养的肾小球系膜细胞株为研究对象,以不同浓度CsA(0,250,500,1000μg/L)孵育细胞,用放免方法测定细胞血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的分泌,分别以RT-PCR、免疫组化和流式细胞术方法检测CsA对细胞表达血管紧张素1型受体(AT1)的影响;以氚标胸腺嘧啶核苷(<3>H-TdR)掺入法观察CsA对细胞增生的影响,以ELISA方法测定不同浓度CsA刺激下细胞TGFβ1及细胞外基质成分纤维连接蛋白(Fn)的分泌情况,以RT-PCR方法检测TGFβ1、Ⅰ型胶原、基质金属蛋白酶(MMP-2)mRNA的表达,同时观察氯沙坦的干预作用;分别以RT-PCR和免疫组化方法检测细胞转录因子AP-1的基因及蛋白表达.
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