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随着人们对猪肉品质要求的不断提高,如何提高肉质已成为当今畜牧业的研究热点。肌内脂肪(Intramuscular Fat,IMF)是评定肉质的主要指标之一,其含量的提高可以改善肉质。IMF沉积是受微效多基因控制的,在基因水平上研究猪肉IMF沉积的调控机理已成为近年的研究热点,但是有关miRNAs与猪IMF沉积关系的研究报道还很少。同时,适宜营养手段对猪IMF沉积的调控是否通过miRNAs发挥作用,也鲜有报道。因此,本研究拟通过两个试验,分别探讨饲粮整体营养水平和添加剂对生长育肥猪背肌IMF沉积的影响,弄清几个脂质代谢相关miRNAs在IMF沉积中的作用。试验一品种和饲粮营养水平对生长育肥猪脂质代谢、肌内脂肪沉积及几个脂质代谢相关miRNAs表达水平的影响本试验旨在研究饲粮不同营养水平和品种对生长育肥猪脂质代谢以及几个脂质代谢相关miRNAs表达水平的影响。分别从猪场选择健康、体重相近、21日龄的大白仔猪和成华仔猪,其中成华仔猪(4.50±0.11kg)30头,随机分为5个重复,每个重复6头仔猪,饲喂成华猪适宜饲粮,记为CH组;大白仔猪(6.15±0.03kg)60头,随机分为两个处理,分别饲喂大白猪适宜饲粮和成华猪适宜饲粮(成华猪适宜营养水平明显低于大白猪适宜营养水平,视为降低饲粮营养水平),记为LW组和LWLN组,每个处理5个重复,每个重复6头仔猪。预饲7天,正式试验从28日龄开始,试验期为191d。试验结束时分别从每个重复选择1头接近平均体重的试猪屠宰取样。结果发现:(1)在采食各自适宜饲粮的条件下,成华猪的背最长肌肌内脂肪含量显著高于大白猪(P=0.014);与LW组相比,饲喂低营养水平饲粮的大白猪(LWLN)背最长肌肌内脂肪含量显著增加(P=0.039)。(2)成华猪血清TG(P<0.01)和TC(P=0.037)含量均显著高于大白猪,肝脏TC含量有高于大白猪的趋势(P=0.084);降低饲粮营养水平显著增加大白猪肝脏TC(P=0.048)、TG(P=0.045)和血清TC(P=0.032)的含量,有增加血清TG含量的趋势(P=0.071)。(3)成华猪背最长肌中PPARγ(P=0.016)、ACC(P=0.025)、PPARα(P=0.021)、PGC-1α(P=0.038)、LPL(P=0.029)以及LIPE(P=0.045)基因的m RNA表达水平显著高于大白猪,SIRT1基因的m RNA表达水平显著低于大白猪(P=0.038);同时,CPT-1的m RNA表达水平有高于大白猪的趋势(P=0.065)。(4)降低饲粮营养水平显著提高大白猪背最长肌中H-FABP(P=0.041)和PPARγ(P=0.020)的m RNA表达水平,极显著提高LPL的m RNA表达水平(P<0.01),有提高ACC(P=0.097)、CPT-1(P=0.076)和LIPE(P=0.073)m RNA表达水平的趋势;同时可显著降低大白猪背最长肌中SIRT1(P=0.014)m RNA表达水平。(5)成华猪肝脏ACC(P=0.037)和PGC-1α(P<0.01)m RNA表达水平显著低于大白猪;降低饲粮营养水平可以显著降低大白猪肝脏CPT-1(P=0.016)和ACC(P=0.030)m RNA表达水平。(6)成华猪背最长肌ssc-miR-27a的相对表达量显著低于大白猪(P=0.043),ssc-miR-181a(P=0.033)和ssc-miR-26a(P=0.047)的相对表达量显著高于大白猪。而降低饲粮营养水平显著降低大白猪背肌中ssc-miR-27a(P=0.045)和ssc-miR-21(P=0.012)的相对表达量。(7)成华猪肝脏ssc-miR-26a的相对表达量与大白猪相比有升高的趋势(P=0.090)。此外,降低饲粮营养水平显著提升大白猪肝脏ssc-miR-370的表达水平(P=0.014),同时有提高ssc-miR-21表达水平的趋势(P=0.097)。综上可见,成华猪与大白猪相比,血脂含量更高,背肌IMF沉积能力更强,背肌ssc-miR-27a的相对表达量更低而ssc-miR-181a则相反;降低饲粮营养水平可以促进大白猪肝脏和背肌的脂质沉积,且显著降低背肌ssc-miR-27a和ssc-miR-21的相对表达量。试验二饲粮添加甜菜碱和白藜芦醇对生长育肥猪生长性能、脂质代谢和几个脂质代谢相关miRNAs表达水平的影响本试验旨在研究饲粮中分别添加甜菜碱和白藜芦醇对生长育肥猪生长性能、肉品质、脂质代谢以及几个脂质代谢相关miRNAs表达水平的影响。选择健康、体重相近(24.67±3.49kg)的DLY去势公猪和母猪各27头,随机分为三个处理,分别为基础组(B)、甜菜碱组(B+1200mg/kg甜菜碱)和白藜芦醇组(B+600mg/kg白藜芦醇);每个处理6个重复(公猪、母猪各3个重复),每个重复3头猪。试验期共119d。结果发现:(1)甜菜碱组猪在每个阶段ADG和ADFI的数值均高于基础组,其中100～125kg阶段,ADG显著提高(P=0.020),而ADFI有升高的趋势(P=0.079)。就全期而言,甜菜碱组猪ADFI相较于基础组提高了8.46%,但差异不显著,ADG则有升高的趋势(P=0.091)。白藜芦醇组猪在各个阶段以及全期的ADG和ADFI相较于基础组均有数值上的提高,但差异不显著。(2)在屠宰后的45min内,甜菜碱组猪的背肌红度显著高于基础组(P=0.044);而在24h时,甜菜碱组(P=0.014)和白藜芦醇组(P=0.033)猪的背肌黄度均显著低于基础组。甜菜碱组(P=0.024)和白藜芦醇组(P=0.038)猪背肌的蒸煮损失均显著低于基础组,甜菜碱组猪的背肌滴水损失则显著高于基础组(P=0.011)。(3)与基础组相比,甜菜碱组猪背肌的IMF含量具有升高的趋势(P=0.083);而白藜芦醇组的猪背最长肌IMF含量则极显著高于基础组(P<0.01)。(4)白藜芦醇组猪血清TG(P=0.031)、TC(P=0.047)、LDL-C(P=0.040)和VLDL(P=0.049)的含量均显著低于基础组;而饲粮添加甜菜碱可以显著降低猪血清LDL-C的含量(P=0.047),有降低VLDL含量的趋势(P=0.096)。(5)与基础饲粮组相比,添加白藜芦醇显著提高了猪背最长肌中PPARγ(P=0.030)、ACC(P=0.031)、FAS(P<0.01)和LPL(P=0.015)的m RNA表达水平,显著降低了猪背肌中SIRT1(P=0.019)、CPT-1(P=0.011)和PPARα(P=0.046)的m RNA表达水平;添加甜菜碱显著提高猪背肌中ACC(P=0.049)和FAS(P=0.044)的m RNA表达水平,显著降低CPT-1(P=0.043)和PPARα(P=0.015)的m RNA表达水平,有降低SIRT1(P=0.083)和PGC-1α(P=0.069)m RNA表达水平的趋势。(6)与基础组相比,白藜芦醇组猪背肌中的ssc-miR-181a(P=0.012)、ssc-miR-21(P=0.016)和ssc-miR-370(P=0.039)的表达水平显著升高,ssc-miR-27a的表达水平则显著降低(P=0.026);甜菜碱组猪背最长肌中ssc-miR-181a的表达水平显著升高(P=0.012)。以上结果表明,甜菜碱具有一定的促生长作用,而白藜芦醇具有较强的降血脂作用。同时,甜菜碱和白藜芦醇均可以提高生长育肥猪的背肌IMF含量;ssc-miR-27a、ssc-miR-181a、ssc-miR-21和ssc-miR-370是白藜芦醇促进生长育肥猪背肌IMF沉积的可能作用靶点,而甜菜碱主要不是通过影响miRNAs的表达来促进IMF沉积的。综上所述,本试验发现降低饲粮营养水平以及添加甜菜碱和白藜芦醇均可以提高生长育肥猪的背肌IMF含量,ssc-miR-27a、ssc-miR-181a、ssc-miR-370和ssc-miR-21可能通过作用于脂质代谢相关的靶基因进而调控生长育肥猪背肌IMF的代谢过程;这些miRNAs也是营养因素调节IMF沉积的潜在靶点。