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目的:研究位于CTH(Cystathionine-gamma-lyase)基因3’非翻译区(3’untranslated region,3’UTR)内的四碱基插入/缺失(Ins/Del,Indel)多态位点(rs1 13044851)与中国汉族人群心源性猝死(Sudden cardiac death,SCD)风险的关联,并通过基因型-表型关联分析及生物信息学方法探究该多态在SCD发生发展中发挥的作用及其潜在分子机制。方法:(1)运用生物信息学工具筛选一批CTH基因3’UTR内的多态位点,并选取其中一个具有潜在功能的多态位点(rs1 13044851)作为候选遗传标记。使用病例-对照研究方法(112例SCD和417例正常对照),采集血液样本,提取基因组DNA,进行PCR扩增,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳对该候选多态位点进行基因分型,运用Logistic回归分析法对多态与SCD风险间的相关性进行分析;(2)使用免疫印迹法(Western blot,WB)检测不同基因型个体心肌组织中CTH蛋白的表达水平,并分析基因型与蛋白质表达量之间的关联;(3)使用Miranda软件预测可与CTH基因3 ’ UTR结合同时受rs 113044851多态位点影响的MicroRNA(miRNA);(4)构建包含rs113044851多态在内的长约300个碱基对(Base pair,bp)的重组质粒载体pGL3-CTH-WT/MT,并与pRL-SV40载体共转染293T细胞系,运用双荧光素酶报告基因分析系统检测不同处理组的荧光素酶活性,以此验证miR-1324对CTH基因表达的影响。结果:(1)基因分型结果表明,位于CTH基因3’UTR的Indel位点rs113044851具有较好的多态性,对照组样本中基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),表明纳入的样本具有群体代表性。校正年龄、性别因素后,采用非条件性Logistic回归分析分型数据,结果表明:Ins/Del基因型个体较Del/Del基因型个体发生 SCD 的风险显著降低(OR=0.61,95%CI:0.37-0.99,P<0.05,Statistical power=0.987);分析等位基因发现,相对于携带Del等位基因的个体,携带Ins等位基因的个体发生SCD的风险明显降低(OR=0.58,95%CI:0.38-0.88,P<0.01)。(2)WB检测结果显示,Del/Del基因型个体心肌组织中CTH蛋白表达量高于Ins/Del基因型个体。(3)Miranda软件预测结果提示,插入型序列可能通过与has-miR-1324结合,在转录后水平抑制CTH基因的表达;缺失型序列则干扰miR-1324与mRNA的结合,减弱了对CTH基因表达的抑制作用。(4)Dual-luciferase assay结果显示,与对照组相比,转染miR-1324的细胞组荧光强度均低于转染mimic control的细胞组荧光强度,且MT(插入型)组的抑制效果更明显。结论:(1)Indel多态位点rs113044851与中国人群SCD风险之间存在显著关联;(2)rs113044851不同基因型与对应心肌组织CTH蛋白表达量之间存在显著的基因型-表型关联;(3)rs113044851多态位点可能通过影响has-miR-1324与CTH3’UTR mRNA的结合,实现对CTH基因表达的调控,进而影响SCD的发生。