背景与目的： 水通道蛋白(AQPs)是一组水选择性通道膜蛋白，其功能可增加细胞膜水的通透性，它提供了液体快速移动途径。目前，在哺乳动物中已发现11种AQPs，其中6种在呼吸道和肺组织有表达，AQP1主要分布于肺毛细血管内皮、气道粘膜上皮和胸膜，肺泡Ⅱ型上皮细胞亦有少量分布。在损伤或感染等引起的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中，肺泡腔、间质和毛细血管间水的转运障碍形成了肺水肿。肺泡Ⅱ型细胞是肺泡上皮的干细胞，是一种多功能肺细胞，在肺水转运中起着非常重要的作用。在ARDS状态下肺泡Ⅱ型细胞AQPs表达变化的研究还未见报道。 我们的研究目的是在成功建立大鼠ARDS模型并分离纯化肺泡Ⅱ型细胞的基础上确定大鼠肺泡Ⅱ型细胞膜上是否存在AQP1，并进一步观察大鼠在油酸所致ARDS状态下Ⅱ型细胞AQP1表达的变化，为ARDS发病机制的研究提供新的实验和理论依据。 方法： 本实验分油酸组和对照组，实验的第一部分通过静脉注射油酸建立ARDS大鼠动物模型，按照Dobbs等提供的方法并适当改进分离大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞，用IgG免疫粘附的方法纯化分离的细胞，细胞鉴定采取鞣酸染色和电镜方法，电镜下观察ARDS大鼠肺泡Ⅱ型细胞的超微结构改变。 第二部分通过免疫组化、免疫电镜、Western Bloting方法鉴定肺泡Ⅱ型细胞上是否存在AQP1，运用免疫组化、Western Bloting和图像分析技术，对正常大鼠和ARDS大鼠Ⅱ型细胞AQP1的表达水平进行对比观察，分析变化，这部分是本课题的重点和关键。结果: 一、大鼠ARDS模型的成功建立:静脉注射油酸制备ARDS大鼠急性动物模型成功率达100%，注入油酸后其动脉血氧分压 (PaO:)显著降低;ARDS大鼠肺组织HE染色观察发现肺泡及间质水肿、出血，粒细胞浸润;电镜观察肺泡n型细胞板层小体排空明显而至空泡化，细胞表面微绒毛减少。 二、大鼠肺泡11型细胞的分离、纯化和鉴定:适当降低消化酶浓度和离心速度可提高分离细胞的活力，细胞分离后用IgG免疫粘附方法纯化可使纯度提高15%，蹂酸染色和电镜鉴定可见n型细胞上的特征性板层小体。 三、大鼠肺泡n型细胞上存在AQPI:免疫组化结果示正常大鼠肺泡n型细胞AQPI呈强阳性染色，细胞被染成深棕褐色，ARDS大鼠肺泡n型细胞AQPI呈阳性染色，阴性对照及空自对照无染色;免疫电镜见AQPI在大鼠肺泡n型细胞膜表面呈高电子密度阳性反应或膜周围可见胶体金颗粒，阳性反应不是连续的。 四、ARDS状态下肺泡H型细胞AQPI的表达下降:westemblot分析显示ARDS大鼠肺泡H型细胞AQPI蛋白条带较对照组明显减弱，免疫组化及W七stem blot经图像分析结果为ARDS状态下n型细胞上水通道蛋白1的表达较对照组有明显的下降，经统计学分析有显著差异(P<0.05)。结论: 一、ARDs大鼠的Pao:较对照组明显下降，组织学和细胞超微结构变化明显。 二、ARDS大鼠肺泡H型细胞的分离难度大，细胞活性低、脆性大，成功的分离是整个实验的基础。ARDS大鼠肺泡H型细胞的成功分离是本实验的一个创新点。 三、AQPI存在于大鼠肺泡n型细胞膜上。 四、ARDS状态下肺泡H型细胞AQPI的表达较对照组有显著的下降（P＜0．05）。本研究从组织、细胞、蛋白分子3个不同层面和水平研究了 ARDS大鼠肺泡＊型细胞上 AQPI表达的变化。国内外尚未见报道，为本实验的主要创新点。 五I泡＊型细胞上 AQPI在 A皿S状态下的变化提示 AQPI对呼吸系统水转运可能起到重要作用，有临床意义。