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白细胞介素-1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor antagonist,IL-1ra)与白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-1β(IL-1β)共为白细胞介素-1(IL-1)家族的一员,他们参与机体的炎症和免疫防御反应,包括许多急性和慢性炎症的病理过程.I1-1ra是拮抗剂家族的一员,主要通过白细胞介素-1受体(IL-1R)起作用,它与IL-1竞争性与IL-1R结合,从而控制IL-1的活性,这种方法已经成为治疗许多疾病的主要手段.目前IL-1ra已在临床上试用于治疗败血症、炎风湿性关节炎、炎症性肠道疾病、哮喘、髓源性白血病,以及移植物抗宿主反应等疾病,并获得了一定的效果.临床需要大量IL-1ra,但是由于缺乏特异性亲和配基,其纯化是限制IL-1ra应用的瓶颈.为了探索简单高效的IL-1ra的纯化工艺,我们根据文献报道的IL-1ra的结构特点,构建可结合IL-1ra的随机化学配基库,固相合成这些介质,以IL-1ra发酵液为原料筛选实验表明,这些配基中puktrp纯化IL-1ra的效果最好.层析条件优化实验表明:固定化puktrp吸附IL-1ra的最佳条件为10mmol/l的磷酸缓冲液(pH6,电导率3mS/cm);洗脱的最佳条件为10mmol/l的磷酸缓冲液(pH6,电导率36mS/cm).在此层析条件下,配套puktrp的最佳上样量为每克配基上样2.25mg IL-1ra,介质对IL-1ra的表观吸附容量为1.35mg/g干胶.采用上述条件进行IL-1ra的制备纯化,用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)和SDS-PAGE电泳进行产品的纯度和回收率分析,结果表明一步纯化的IL-1ra的纯度可达99.8﹪(电泳纯)、96.5﹪(HPLC纯),回收率为62.8﹪.配基稳定性实验表明,配套puktrp经2mol/l的NaOH溶液37℃处理7天7夜,吸附容量没有变化,IL-1ra的纯度也没有变化,这说明亲和介质的稳定性很高,适用于大规模工业生产.对纯化后的样品进行Western-blotting分析,结果看出,纯化所得样品与兔抗IL-1ra血清具有很高的亲和作用,证明纯化得到的样品是有活性的、是所要的IL-1ra,而且得到的样品的纯度也非常高.