核糖体蛋白L29在舌鳞状细胞癌中的表达及意义

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目的:研究核糖体蛋白L29(Ribosomal Protein L29,RPL29)在人舌鳞状细胞癌(简称舌鳞癌)中的表达及意义。方法:从青岛市市立医院的口腔颌面外科收集52例舌鳞癌患者的肿瘤与癌旁组织标本。利用免疫组化SP技术对组织标本中的RPL29蛋白表达量进行检测,并分析其表达与病理分级、T分期、淋巴结转移情况、性别、年龄、饮酒和吸烟史之间的关系。用特异性RPL29-siRNA干扰舌鳞癌CAL-27细胞中RPL29表达,设立阴性对照组(NC-siRNA转染组),空白对照组(加入等量转染试剂,不转染任何siRNA)。RT-PCR法检测RPL29 mRNA的表达,蛋白质印迹法检测RPL29蛋白的表达,Transwell小室对细胞侵袭能力进行分析,细胞划痕法对细胞的迁移能力进行检测。采用SPSS21.0软件包对数据进行统计学处理,免疫组化中RPL29在舌鳞癌及癌旁组织的表达水平差异和RPL29表达水平与临床参数的分析均采用χ~2检验;细胞实验组间利用t检验进行比较,p小于0.05表明差异明显。结果:舌鳞癌组织的RPL29表达均为低表达(29例)或者是高表达(23例),不存在阴性表达;癌旁组织RPL29表达均为阴性表达(18例)或者低表达(34例),不存在高表达。舌鳞癌组织RPL29蛋白表达量显著高于癌旁组织中表达量(p<0.05),表达水平与舌鳞癌患者是否发生颈淋巴结转移之间存在显著差异(p<0.05),颈淋巴结转移舌鳞癌患者的强阳性RPL29蛋白表达率达到66.7%(12/18),是没有转移表达率的的两倍多(32.4%,11/34)。另外RPL29的表达与舌鳞癌患者的性别、年龄、病理分级、T分期、饮酒和吸烟史之间无明显的差异(p>0.05)。和阴性对照组和空白实验组比较,实验组CAL-27经过RPL29-siRNA转染后,RPL29mRNA和蛋白表达显著下降(p<0.05),实验组CAL-27细胞穿膜细胞的数量明显减少(p<0.05),12h和24 h划痕相对愈合面积明显降低(p<0.05),表明干扰RPL29表达后,舌鳞癌CAL-27细胞的体外侵袭和迁移能力降低。结论:RPL29在舌鳞癌组织中表达显著高于癌旁组织,推测RPL29有可能为舌鳞状细胞癌的一种促进因子,与舌鳞癌的发生、发展进程紧密相关。有颈淋巴结转移者,舌鳞癌组织中RPL29表达水平显著高于无颈淋巴结转移者,推测RPL29有可能和舌鳞癌淋巴转移之间存在一定相关性,参与舌鳞癌的转移进程。RPL29的表达情况反映了肿瘤发生转移的可能性。使用特异性siRNA干扰RPL29在CAL-27舌鳞癌细胞内的表达之后会明显降低细胞的侵袭与迁移能力,推测RPL29在细胞侵袭和转移进程中具有相当的调控能力,对RPL29影响机制的进一步研究将为人类舌鳞癌的早期诊断治疗提供新思路。
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