miR-140-5p在肾透明细胞癌中的生物学功能研究

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目的:阐明mi R-140-5p在肾透明细胞癌组织及细胞株中的表达,证实mi R-140-5p能够抑制786-0细胞的侵袭及迁移,并研究mi R-140-5p抑制786-0细胞侵袭和迁移的机制。方法:1.通过慢病毒感染的方法构建过表达mi R-140-5p的786-0细胞。2.通过Transwell和划痕实验验证慢病毒感染786-0细胞侵袭和迁移的影响。3.用q RT-PCR检测在肾透明细胞癌组织及细胞株中mi R-140-5p的表达及慢病毒感染786-0细胞中Jagged1 m RNA的表达。4.Western blot实验检测慢病毒感染786-0细胞后Notch信号通路相关蛋白的表达。5.利用在线生物学软件Targetscan、mi RDB和Pictar预测mi R-140-5p的潜在靶基因。6.rescue实验验证Jagged1过表达是否可以逆转mi R-140-5p对786-0细胞侵袭、迁移的抑制。结果:1.mi R-140-5p在肾透明细胞癌组织中的表达明显低于癌旁组织;且在786-0细胞中mi R-140-5p的表达较HK-2细胞明显降低。2.成功构建过表达mi R-140-5p的786-0细胞。3.过表达mi R-140-5p可以抑制786-0细胞侵袭和迁移。4.过表达mi R-140-5p能够引起786-0细胞中Jagged1 m RNA的表达降低。5.过表达mi R-140-5p可以使786-0细胞中Jagged1、hey1、adam10蛋白表达量降低。6.在线生物学软件Targetscan、mi RDB和Pictar预测的交叉结果显示Jagged1是mi R-140-5p的潜在靶基因。7.rescue实验表明Jagged1过表达可以部分逆转mi R-140-5p对786-0细胞侵袭、迁移的抑制。结论:1.mi R-140-5p在肾透明细胞癌组织及细胞株中低表达。2.mi R-140-5p可抑制786-0细胞侵袭和迁移。3.过表达mi R-140-5p可能通过调控Jagged1从而抑制786-0细胞侵袭和迁移。本课题的研究提示mi R-140-5p可能是肾透明细胞癌靶向治疗新的靶点。
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