目的:肌硬膜桥（Myodural bridge,MDB）是枕下区深层肌经寰枕后膜、寰枢后膜连接上颈段硬脊膜的结缔组织桥,头后小直肌、头后大直肌、头下斜肌及项韧带均参与肌硬膜桥的组成。已有研究证明肌硬膜桥在哺乳动物中普遍存在。肌硬膜桥作为进化过程中没有退化的结构,其存在必定有非常重要的生理功能。以往研究已对肌硬膜桥的生理功能做出了推测,本课题组提出了头部运动可能通过肌硬膜桥为脑脊液提供了循环动力的功能假说。此外,研究还发现肌硬膜桥的主要成分为Ⅰ型胶原纤维,并通过对肌硬膜桥组成的研究提出了肌硬膜桥复合体的概念。目前对MDB的组成、连接方式及纤维组成等已有详细描述,但关于MDB发育学方面的研究甚少。以往研究发现细胞凋亡是生物发育过程中重要的生理过程,尤其对肌肉肌腱的形态发生有着重要的作用。SD大鼠已被证实存在MDB结构,且MDB与肌腱的主要成分相同。所以本研究选取SD大鼠为研究对象,通过观察MDB发育过程中细胞组成及其超微结构的变化和组织形态的变化,来探究和揭示MDB的细胞发育规律,同时明确细胞凋亡是否参与MDB的发育过程。材料和方法:本研究选取SD大鼠为研究对象。经4%水合氯醛麻醉、10%福尔马林溶液固定后的胎鼠（E12～E21）30例及出生后0～3天的新生鼠8例制作成石蜡切片,用于HE、铁苏木染色及TUNEL法染色。经4%水合氯醛麻醉、2.5%戊二醛固定后的胎鼠（E13～E20）12例用于透射电镜观察。结果:HE与铁苏木染色结果显示:（1）E12～E13,该区域的细胞成分以星形多突起状、核仁明显、胞质浅染的间充质细胞为主。（2）E14～E17,该区域的主要细胞成分逐渐由间充质细胞转变为成纤维细胞,成纤维细胞核仁明显、细胞突起逐渐交织成网状,且细胞排列出现腹侧紧密、背侧松散的分层现象。（3）E18～E21,可见在该区域主要由成纤维细胞组成寰枕后膜和寰枢后膜,硬脊膜与背侧的枕下肌组织间通过成纤维细胞和胶原纤维相连接,呈长梭形、胞体较小、胞质较少、胞核深染的纤维细胞也开始出现。同时成纤维细胞与纤维细胞之间开始出现胶原纤维,纤维数量逐渐增多,纤维排列方向逐渐从无序到有序、平行排列。（4）P0～P3,纤维细胞为主要细胞成分,同时纤维细胞间的胶原纤维增多,规则有序地平行排列。TUNEL法检测结果显示:（1）E12～E16,观察区域阳性细胞较多,细胞凋亡活跃。（2）自E17开始,该区域阳性细胞数目明显减少,出生后基本未见阳性细胞。胎鼠及新生鼠标本枕骨至第二颈椎中线两侧取材进行透射电镜观察,结果显示:（1）E13以前,该区域细胞成分以间充质细胞为主。电镜下间充质细胞多呈圆形或椭圆形,细胞核较大,细胞质较少,核质比大,细胞质内有少量r ER。间充质细胞间散在分布有凋亡细胞。凋亡细胞核内异染色质凝集边集,核膜皱缩,细胞边缘形成凋亡小体,但细胞形态依旧保持完整。（2）E14间充质细胞有丝分裂活跃,同时部分间充质细胞开始向成纤维细胞分化。电镜下成纤维细胞呈扁平状、两端有细长的细胞突起,胞质内有丰富的r ER。镜下可见凋亡细胞。（3）E16开始成纤维细胞出现规则的平行排列,并开始产生少量胶原纤维。镜下可见凋亡细胞。（4）E18成纤维细胞产生大量胶原纤维,电镜下可见胶原原纤维明暗交界的横纹,并且寰枕间隙、寰枢间隙开始出现纤维细胞。纤维细胞呈长梭形,胞体细小,胞质较少。镜下凋亡细胞减少。（5）E20成纤维细胞和纤维细胞为组成MDB的主要细胞成分,细胞间有粗大的胶原纤维束,MDB背侧出现RCPmi。多个视野下仅观察到一个凋亡细胞。结论:本研究结果显示,间充质细胞、成纤维细胞及纤维细胞与肌硬膜桥的发育密切相关,E14、E16、E18及P0是肌硬膜桥的发育过程中4个关键的时间点。本研究明确了SD大鼠胚胎发育过程中,颈枕部交界区的细胞形态变化特征及发育规律,研究结果将有助于进一步开展MDB的功能及机制的深入研究。