【摘 要】
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目的脑卒中是目前导致我国人口死亡及残疾的主要病因,其发病率和死亡率仍在不断增加,严重威胁人类健康,其中缺血性脑卒中较为多发。近年来研究发现,脑缺血再灌注损伤可能与细胞焦亡有关。电针对脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用,但具体的保护机理比较复杂,尚未完全阐明。本研究以细胞焦亡关键基因Caspase-1为切入点,研究电针对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机理,为临床电针治疗缺血性脑卒中进一步提供科学依据。方法
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（81674048）；
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目的脑卒中是目前导致我国人口死亡及残疾的主要病因,其发病率和死亡率仍在不断增加,严重威胁人类健康,其中缺血性脑卒中较为多发。近年来研究发现,脑缺血再灌注损伤可能与细胞焦亡有关。电针对脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用,但具体的保护机理比较复杂,尚未完全阐明。本研究以细胞焦亡关键基因Caspase-1为切入点,研究电针对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机理,为临床电针治疗缺血性脑卒中进一步提供科学依据。方法用随机数字法将60只雄性Sprague Dawley（SD）大鼠分为5组,即假手术组（Sham group）、模型组（IR group）、电针组（EA group）、Caspase-1 抑制剂组（YVAD group）、Caspase-1 抑制剂+电针组（YVAD+EA group）,每组 12 只。除假手术组外,其余各组参照改良的Zea Longa法制作脑缺血再灌注模型。电针组造模后取患侧（右侧）“合谷”、“尺泽”与“三阴交”、“足三里”4个穴位进行电针干预1次,干预时间为20min。Caspase-1抑制剂组和Caspase-1抑制剂+电针组在造模前30min经侧脑室缓慢注射Caspase-1抑制剂Z-YVAD-FMK,Ca spase-1抑制剂+电针组在造模后进行电针干预,干预方式与电针组相同。假手术组只暴露左侧颈部动脉,不予线栓栓塞。采用神经行为学Zea Longa评分法评定大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能症状,TTC染色法观察病灶侧脑组织的梗死情况,透射电镜观察缺血灶的细胞焦亡情况,荧光定量PCR检测Caspase-1 mRNA表达及免疫印迹检测Caspase-1表达水平。结果1.神经功能缺损评分:SD大鼠在脑缺血再灌注后会出现神经功能缺损症状,电针组、Caspase-1抑制剂组、Caspase-1抑制剂+电针组神经功能缺损评分较模型组降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。2.脑组织梗死体积:SD大鼠脑缺血再灌注后脑组织会出现梗死现象,电针组、Caspase-1抑制剂组、Caspase-1抑制剂+电针组脑梗死体积较模型组减小,差异具有统计学差异（P<0.05）。3.细胞焦亡:SD大鼠脑缺血再灌注后神经细胞会发生焦亡,表现为细胞核固缩,染色质DNA断裂,细胞肿胀破裂,细胞膜上有孔隙形成,其完整性丧失,渗透性增高,胞质内容物释放。电针及Caspase-1抑制剂干预后,细胞焦亡现象减轻。4.Caspase-1 mRNA表达:SD大鼠脑缺血再灌注后脑内Caspase-1 mRNA表达升高,电针组、Caspase-1抑制剂组、Caspase-1抑制剂+电针组的Caspase-1 mRNA表达较模型组降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。5.Caspase-1表达:SD大鼠脑缺血再灌注后脑内Caspase-1表达升高,电针组、Caspase-1抑制剂组、Caspase-1抑制剂+电针组的Caspase-1表达较模型组降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论电针“合谷”、“尺泽”与“三阴交”、“足三里”可有效减轻SD大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能缺损症状和脑梗死体积,减轻细胞焦亡现象,降低Caspase-1表达,发挥脑保护作用。其保护作用机理可能与电针下调Caspase-1表达有关。“电针刺激—调控Caspase-1—抗细胞焦亡—抗脑缺血再灌注损伤—促进神经功能恢复”可能是电针调控脑缺血再灌注损伤的机制之一。
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