为了解近年来河南省规模化奶牛场牛传染性鼻气管炎的流行情况,课题组于2015年2月至8月,采用分层随机抽样法,对河南省5个地区(即豫东、豫西、豫南、豫北及豫中)的12个规模化奶牛场进行抽样调查。随机选取牛群中不同年龄阶段、不同健康状况的牛,共采集血液样品400份、鼻拭子和阴道拭子样品776份,按常规方法分离血清,提取拭子DNA并冷冻保存待检。首先运用酶联免疫吸附实验方法(ELISA)对采集的400份血清样品进行检测,共检测出IBRV抗体阳性血清210份,总体阳性率为52.50%(210/400),场阳性率为100%。结果显示:5个地区的阳性率由低到高依次为豫东(20.00%)、豫中(36.75%)、豫北(60.84%)、豫西(84.62%)、豫南(85.07%);不同年龄段奶牛的阳性率不同,犊牛、后备青年牛、1胎、2胎、3胎、4胎以上牛分别是18.18%、11.11%、59.00%、70.69%、66.67%、60.71%;患病牛IBRV的平均血清阳性率为57.14%,明显高于外观健康牛的51.52%。结果表明,河南省奶牛场普遍感染IBRV。与2010年调查的结果相比略微下降,但是仍处于相对较高的水平,豫东、豫中地区有所下降,而豫西、豫南、豫北地区均有不同程度的升高。而且随着年龄的增长,血清抗体阳性率整体上呈上升的趋势。最后发现IBRV感染与奶牛的多种临床病症有密切的关系,其中患乳房炎和繁殖障碍牛的平均阳性率较高。其次运用荧光定量PCR方法,对采集的440头牛的776份拭子样品进行了检测,共检测出阳性68头,总体阳性率为15.45%(68/440),场阳性率为100%,其中阳性率最高场达到了68.00%,最低场为6.67%。结果显示:5个地区的阳性率由低到高依次为豫东(10.00%)、豫中(10.78%)、豫北(12.04%)、豫西(20.00%)、豫南(35.82%);不同年龄段奶牛的阳性率不同,犊牛、后备青年牛、1胎、2胎、3胎、4胎以上牛分别是3.57%、6.67%、23.53%、26.22%、14.55%、28.57%;患病牛IBRV的平均拭子阳性率为28.13%,明显高于外观健康牛的13.23%。与血清流行病学调查结果相比,拭子的阳性率明显较低,但是两者结果一致,均能有效的反映出各个地区IBRV的感染情况。其中豫西、豫南地区的阳性率较高,明显高于豫东、豫中和豫北地区。并且随着牛年龄的增长,拭子的阳性率整体呈上升的趋势。不同健康状况牛的拭子阳性率中,患有乳房炎牛群的阳性率最高。本次实验通过血清学和病原学调查相结合的方式,首次运用荧光定量PCR的方法对牛拭子的IBRV阳性率进行检测。并对不同地区、不同年龄阶段、不同健康状况牛群的血清抗体阳性率和拭子阳性率做了详细的分析,发现IBRV的流行感染与牛的年龄、动物机体的健康状况、牛场的分布、饲养管理和卫生条件等都有密切的关系。本研究直接揭示了IBRV在河南省5个地区的规模化牛场中的病原感染情况,为我省规模化牛场的IBRV的预防和控制提供了一定的参考依据。