山楂叶有效成分的提取分离及含量测定研究

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山楂为蔷微科山楂属植物山里红(Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br)或山楂(Crataegus pinnatifida Bge.)的干燥成熟果实。主要功能为消食健胃、行气散瘀。用于肉食积滞、胃脘胀满、泻痢腹痛、瘀血经闭、产后瘀阻、心腹刺痛及高血脂症等。近年来,用山楂叶治疗心血管方面疾病的研究较多。其化学成分主要有三萜和黄酮两大类,尤其以黄酮类研究较多。本文从化学成分和含量测定两方面对山楂叶进行了系统研究。 利用硅胶柱色谱,聚酰胺柱色谱,Sephadex LH-20柱色谱,制备HPLC等手段,从山楂叶的体积份数为80%的乙醇-水提取物中分离得到16个化合物,鉴定了14个化合物的结构。其中黄酮类化合物有8个,三萜类2个,其它类化合物6个。通过波谱解析及化学方法确定了他们的化学结构,分别为:2α,3β,19α-三羟基熊果酸(2α,3β,19α-trihydroxyl ursolic acid,1),熊果酸(ursolic acid,2),牡荆素(vitexin,3),2″-O-鼠李糖基牡荆素(2″-O-rhamnosyl vitexin,4),山楂叶苷A(shanyenoside A,5),山奈酚(kaempferol,6),槲皮素(quercetin,7),3-O-β-D-吡喃半乳糖槲皮素(3-O-β-D-galacopyanosyl quercetin,8),3-O-β-D-吡喃葡萄糖槲皮素(3-O-β-D-glucopyanosyl quercetin,9),芦丁(rutin,10),β-谷甾醇(β-sitosterol,11),胡萝卜苷(daucosterol,12),十六碳酸(hexadecanoic acid,13),p-硝基苯酚(p-nitrophenol,14)。其中化合物5为一新化合物,化合物1为本属植物中首次分离得到的已知化合物。 建立山楂叶提取物和山楂叶药材的含量测定方法。通过紫外-可见分光光度法,以芦丁为对照品对山楂叶及山楂叶提取物中的总黄酮进行含量测定;应用反相HPLC,以山楂叶中的活性成分2″-O-鼠李糖牡荆素和牡荆素为指标成分对山楂叶提取物和山楂叶药材进行了含量测定,为山楂黄酮类药物的质量控制提供依据。 生物活性实验显示山楂叶中的单体化合物1、化合物6、化合物7显示抗诺瓦克样病毒(Norwalk-like viruses,NLVs)活性;而化合物3、化合物5、化合物13则无活性或甚至可能有助于病毒结合。
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