【摘 要】
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由芸苔生链格孢菌（Alternaria brassicicola）引起的黑斑病是采后西兰花储运及销售过程中最常见且发病率最高的真菌性病害之一,由此引起的腐烂和品质劣变可造成巨大的经济损失。利用拮抗酵母进行生物防治的方法因其高效、安全等优点,被广泛应用于果蔬采后病害的控制,且已经取得了良好的效果。但拮抗酵母应用于西兰花采后病害控制的研究报道很少,其控制机制尚不明确。本论文从健康西兰花上筛选对采后西兰
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由芸苔生链格孢菌（Alternaria brassicicola）引起的黑斑病是采后西兰花储运及销售过程中最常见且发病率最高的真菌性病害之一,由此引起的腐烂和品质劣变可造成巨大的经济损失。利用拮抗酵母进行生物防治的方法因其高效、安全等优点,被广泛应用于果蔬采后病害的控制,且已经取得了良好的效果。但拮抗酵母应用于西兰花采后病害控制的研究报道很少,其控制机制尚不明确。本论文从健康西兰花上筛选对采后西兰花黑斑病和自然腐烂具有控制作用的拮抗酵母,通过研究该拮抗酵母对西兰花活性氧（ROS）代谢、呼吸代谢和能量水平的影响,并借助于代谢组学技术和生物信息学分析其对西兰花代谢物的影响,初步揭示该拮抗酵母控制西兰花采后病害的机制,为拮抗酵母应用于采后西兰花病害的控制提供理论支撑和技术支持,对于西兰花采后的贮藏保鲜具有一定实际应用价值。论文主要研究结果如下:（1）从感病西兰花上分离到一株病原菌—芸苔生链格孢菌（A.brassicicola）,经科赫法则验证,确认其为采后西兰花黑斑病病原菌。（2）通过体内和体外试验,从健康西兰花上筛选到一株拮抗酵母—季也蒙酵母（Meyerozyma guilliermondii）,急性经口毒性试验确认该酵母为实际无毒类。（3）考察不同浓度M.guilliermondii对西兰花采后黑斑病的控制效果,结果表明1×10~8 cells/m L的M.guilliermondii对西兰花采后黑斑病的控制效果最好,并能显著降低西兰花自然腐烂的病情指数,且可以在一定程度上缓减西兰花的品质劣变。（4）通过考察M.guilliermondii对西兰花呼吸代谢相关酶活性、能量水平、ROS代谢相关酶活及相关物质含量的影响,分析其控制西兰花采后病害的机制。结果表明,M.guilliermondii可提高贮藏前期西兰花丙酮酸激酶（PK）、琥珀酸脱氢酶（SDH）、6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）以及细胞色素氧化酶（CCO）的活性,降低贮藏后期上述酶的活性,从而为机体生命活动提供充足的物质来源和能量,并能在后期降低西兰花的呼吸代谢,延缓其衰老;该酵母还能提高西兰花能荷（EC）水平,使其维持在较高的能量状态;M.guilliermondii处理还能提高西兰花ROS代谢相关酶过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）、谷胱甘肽还原酶（GR）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）的活性,降低H2O2、O2-的含量以及膜脂过氧化物丙二醛（MDA）的含量,从而提高西兰花抗氧化能力,增强其抗病性。（5）借助于代谢组技术研究西兰花与M.guilliermondii互作时代谢物含量的变化,结合生物信息学分析拮抗酵母控制西兰花采后病害的机制,主要包括一下几方面:M.guilliermondii通过影响西兰花谷胱甘肽代谢、脂肪酸代谢、糖代谢以及核苷酸代谢相关物质的含量,并提高酚类、萜类以及生物碱等抗性物质的合成,提高西兰花的抗病性。
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