【摘 要】
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研究背景及目的 胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,亦是全球第二大死亡原因。在中国其发病率在男性中仅次于肺癌。据报道,新发胃癌约一半发生于东亚国家,而其死亡率也高于其他国家,我国也是胃癌高发地之一。目前我国胃癌的早期诊断率仍较低。MicroRNA是一类非编码单链核糖核酸,主要通过反馈性影响mRNA的稳定性和翻译,参与多细胞生物中基因表达的转录后调节。其在细胞内具有重要的调节功能。随着miRNA研究的
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研究背景及目的 胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,亦是全球第二大死亡原因。在中国其发病率在男性中仅次于肺癌。据报道,新发胃癌约一半发生于东亚国家,而其死亡率也高于其他国家,我国也是胃癌高发地之一。目前我国胃癌的早期诊断率仍较低。MicroRNA是一类非编码单链核糖核酸,主要通过反馈性影响mRNA的稳定性和翻译,参与多细胞生物中基因表达的转录后调节。其在细胞内具有重要的调节功能。随着miRNA研究的深入,其在各种肿瘤中的功能及调控机制不断被揭示。本研究通过miRNA表达谱芯片高通量检测分析胃癌组织与癌旁组织中miRNA的表达差异,并进一步发现对胃癌发生发展起重要调控作用的miRNA,为胃癌的早期诊断及预后预测提供新的切入点及理论支持。方法 1.利用miRNA表达谱芯片高通量检测6对胃癌及癌旁非肿瘤胃粘膜上皮组织中miRNA表达情况,并由此筛选出差异表达miRNA。2.通过临床信息和病理资料,统计分析差异表达hsa-miR-1275表达量与胃癌临床特点及预后的相关性。3.采用体外细胞学实验探究hsa-miR-1275对胃癌细胞系的增殖成瘤、侵袭迁移等能力的影响。4.结合生物信息学及分子生物学实验技术,筛查验证hsa-miR-1275下游靶基因。5.通过功能回复实验验证hsa-miR-1275发挥抑癌功能是否由其靶基因SPOCK1介导。6.利用胃癌组织及正常胃上皮组织样本进一步探究hsa-miR-1275/SPOCK1/EMT轴在胃癌中的调控情况。结果 1.通过高通量芯片筛选及qPCR验证,hsa-miR-1275在胃癌组织中表达下调较明显。2.hsa-miR-1275低表达与肿瘤Borrmann分型、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期存在显著的相关性。hsa-miR-1275低表达的胃癌患者其预后更差,生存时间更短（中位生存期14.3月vs 22.1月,p<0.001）。hsa-miR-1275低表达是胃癌的独立危险因素。3.在体内外实验中,hsa-miR-1275明显抑制胃癌的增殖成瘤及侵袭转移能力。4.hsa-miR-1275通过靶向下调SPOCK1从而抑制上皮间质转化过程,发挥肿瘤抑制作用。结论 hsa-miR-1275的表达降低,导致对其靶基因SPOCK1的负调控减弱,从而促进胃癌细胞上皮间质转化,促进胃癌转移。hsa-miR-1275低表达是胃癌的独立危险因素,因此其可作为潜在的胃癌预后生物标志物或治疗靶标。
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