【摘 要】
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目的:评价补肾通络方对绝经后骨质疏松模型骨重建影响和对体外骨形成和骨吸收模型的影响,并探讨补肾通络方是否通过Chemerin调控骨重建过程。方法:（1）将84只SD大鼠随机分为7组（n=12）和56只Chemerin敲除（Rarres2-/-）小鼠分别按随机数表法分为7组（n=8）,分别为假手术组、模型组、阿仑膦酸钠组、氟化钠组、补肾组、通络组、补肾通络组。分别予以生理盐水、阿仑膦酸钠悬溶液、氟化
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（81774335,81473390）； 第六批全国老中医药专家学术经验继承项目；
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目的:评价补肾通络方对绝经后骨质疏松模型骨重建影响和对体外骨形成和骨吸收模型的影响,并探讨补肾通络方是否通过Chemerin调控骨重建过程。方法:（1）将84只SD大鼠随机分为7组（n=12）和56只Chemerin敲除（Rarres2-/-）小鼠分别按随机数表法分为7组（n=8）,分别为假手术组、模型组、阿仑膦酸钠组、氟化钠组、补肾组、通络组、补肾通络组。分别予以生理盐水、阿仑膦酸钠悬溶液、氟化钠溶解液、补肾中药、通络中药、补肾通络中药灌胃,1次/天,灌胃8周。（2）建立Mc3t3-E1成骨模型及Raw264.7破骨分化模型,分别设空白对照组、补肾组、通络组及补肾通络组。各组分别予以相应中药,干预24h后检测相关基因及蛋白表达。（3）建立Chemerin沉默后Mc3t3-E1成骨模型和Raw264.7破骨分化模型,分别设空白对照组、补肾组、通络组及补肾通络组,各组分别予以相应中药,干预24h后检测相关基因及蛋白表达。（4）建立Mc3t3-E1成骨模型及Raw264.7破骨分化模型,分别设空白对照组、Chemerin+补肾组、Chemerin+通络组以及Chemerin+补肾通络组,各组分别予以相应药物,干预24h后检测相关基因及蛋白表达。结果:（1）与对照组相比,模型组大鼠及Chemerin-/-小鼠体重均明显增加;与模型组相比,BSTL组大鼠及小鼠体重均无明显变化。（2）与对照组相比,模型组大鼠及Chemerin-/-小鼠骨密度均明显减少,血清炎症因子水平均明显增加;与模型组相比,BSTL组大鼠骨密度明显增加,BSTL组Chemerin-/-小鼠骨密度显著增加,BSTL组大鼠血清TNF-α表达明显降低,BSTL组Chemerin-/-小鼠血清IL-1、IL-6以及TNF-α表达均明显减少。（3）与对照组相比,模型组大鼠及Chemerin-/-小鼠成骨相关蛋白及基因均明显减少,与模型组相比,BSTL组大鼠蛋白RANKL/OPG 比值明显降低,β-catenin mRNA及蛋白表达明显增加;BSTL组Chemerin-/-小鼠成骨相关基因Runx2、OPG和β-catenin mRNA表达明显增加,破骨相关基因TRAP、CTSK、RANKL和RANK mRNA表达明显减少。（4）在正常Mc3t3-E1细胞中,与对照组相比,BSTL组骨形成相关蛋白OPG、β-catenin 表达明显增加,同时β-catenin、Runx2、OPG 和 BALP mRNA 表达明显增加;在Chemerin沉默Mc3t3-El细胞中,与对照组相比,BSTL组β-catenin和OPG蛋白及基因表达明显增加,BALP和Runx2 mRNA表达显著增加;在Chemerin干预Mc3t3-E1细胞中,与对照组相比,BSTL组成骨相关基因OPG、β-catenin、Runx2 和 BALP mRNA 表达明显增加。（5）在正常Raw264.7细胞中,与对照组相比,BSTL组RANK蛋白及mRNA表达明显减少,TRAP、CTSK及Chemerin mRNA表达均明显减少;在Chemerin沉默Raw264.7细胞中,与对照组相比,BSTL组RANK蛋白明显减少,RANK、TRAP和CTSK mRNA均明显减少;在Chemerin干预Raw264.7细胞中,与对照组相比,BSTL组RANK、TRAP和CTSK mRNA均明显减少。结论:（1）补肾通络方能通过Wnt/β-catenin通路促进成骨细胞相关基因及蛋白表达,促进骨形成;补肾通络方通过RANKL/RANK/OPG通路抑制破骨细胞分化、成熟,从而抑制骨吸收,改善骨重建。（2）在Chemerin敲除小鼠中,补肾通络方能分别通过Wnt/β-catenin和RANKL/RANK/OPG通路促进骨形成以及抑制骨吸收。（3）离体实验表明,补肾通络方通过抑制Chemerin而促进骨形成相关基因表达,抑制骨吸收相关基因表达。Chemerin干预后,成骨相关基因减少而破骨相关基因增加,补肾通络方干预后能够逆转,使得成骨基因增加而破骨基因减少。
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