转萝卜过氧化物酶基因RsPrx1酵母表达条件优化及其抗性机理研究

来源 :河南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ythsl761208
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
植物过氧化物酶的功能多样,在植物的生长过程中发挥着重要的作用,本实验采用转基因技术研究植物过氧化物酶的功能,一方面更深入的了解了目的基因的功能,另一方面也为目的基因的工业化应用提供了理论依据。为更好地研究植物过氧化物酶生物效应的多样性和复杂性提供了一个新的思路和方法。本实验选用已经成功构建转萝卜过氧化物酶基因RsPrx1的酵母菌株(GSRP25)为研究对象,对转基因酵母培养基优化,添加0.5g/L亚铁血红素和0.5ml/L微量元素,经过优化后的BMMY培养基培养的GSRP25的最大分泌过氧化物酶酶活达到30.9U/mL,是普通BMMY培养基所获得酶活量的5.92倍,经SDS-PAGE电泳检测出目的条带的表达量也相对显著增强。其次,对转基因酵母GSRP25进行抗性方面的研究,实验结果表明:诱导—不诱导培养条件下转萝卜过氧化物酶RsPrx1酵母的抗盐、抗氧化及抗高温和低温功能高于不诱导—诱导培养条件。其中,抗盐和抗高温功能最强。因此对GSRP25进行抗盐方面的深入研究。从菌液浓度(OD600)、POD酶活和可溶性蛋白含量等生理生化指标可以看出转基因酵母GSRP25的抗盐胁迫能力要强于野生型的毕赤酵母GS115。从代谢机理分析,提取酵母总RNA,采用半定量RT-PCR的方法进行抗性基因表达鉴定,结果证明:抗性基因HSP12、CTT1在两种菌株中都有不同程度的表达,但在GSRP25中的表达量都要高于GS115,说明RsPrx1在酵母中不仅起到了保护酵母抗盐胁迫的作用,还能够在一定程度上对酵母自身抗性基因进行转录水平调控,增加它们的表达量,提高酵母的抗盐胁迫能力。综上所述,本实验不仅通过优化培养基提高了RsPrx1基因的表达量,更重要的是证明了RsPrx1基因具有抗盐、抗氧化、抗高温的作用,以及提高酵母抗盐性的明显效应。
其他文献
分子势能函数是研究理论化学、原子与分子物理等学科的基础。从理论计算的角度推导出双原子分子的势能函数,尤其是双原子分子激发态的势能函数一直是原子与分子物理重要的研究课题之一。这是因为,一方面势能函数是分子本身几何结构及电子结构的完全描述,另一方面双原子分子势能函数还是构造多原子分子全空间势能函数的基础和研究原子分子碰撞、分子反应动力学的关键和分子稳定性的依据。分子在外场作用下的特性研究,已成为一个新
在粒子物理中,建立在规范群SU(3)C(?)SU(2)L(?)U(1)Y基础之上的描写强相互作用和电弱相互作用的规范理论——标准模型,在过去的三十多年中该模型得到了充分的验证,被认为是迄今为止对微观粒子相互作用规律描述最完美的理论之一。然而,标准模型自身也存在着一些缺陷并不是完美无缺的,至今它所存在的某些问题还没有得到合理的解决。所以粒子物理的标准模型并不是一个终极的理论,它应该是某一能标下的一个
本文主要研究组合学中比较重要的两类多项式与数,即Bernoulli多项式与Euler多项式以及Bernoulli数与Euler数,同时也研究了广义Apostol-Bernoulli多项式与Apostol-Euler多项式及其它们的q一模拟,得到若干新的性质与组合恒等式.在第一章中,我们引进Bernoulli和Euler多项式与数的基本概念和符号.在第二章中,运用生成函数的基本方法,给出若干关于广义
19世纪初期,一批优秀的俄国爱国青年从贵族阶层中脱颖而出。他们不满沙皇专制下俄国发展落后的现状,同情深受农奴制压迫的广大社会下层民众,率先向沙皇专制制度和农奴制发起挑战,于1825年12月发动了武装起义,他们由此被称为十二月党人。但十二月党人为改变俄国现状而进行的推翻专制制度和农奴制的尝试最终告终失败了。沙皇尼古拉一世残酷镇压了此次起义,并将121名十二月党人逐出故土,流放到遥远偏僻的西伯利亚,直
真核生物的RNA聚合酶II以多蛋白复合体形式发挥作用。1999年从高度磷酸化的RNA聚合酶II中首次分离出Elongator复合物。已经证明该复合物在以染色质为模板的转录延伸中具有非常重要的作用。该复合物由六个亚基组成,分别是Elp1,elp2,elp3,elp4,elp5,elp6。其中具有组蛋白乙酰转移酶活性的催化亚基Elp3的功能最引人注目,它属于GANT家族。Elp3缺失可导致多种生长缺陷
随着社会主义市场经济的发展和城镇化进程的加快,城市社区在经济社会发展中的地位越来越重要,社区服务初步形成了多元主体参与的局面,但社区居民对社区服务的需求越来越多,要求越来越高。因此在新时代社区服务不能只着眼于供给的充足,更要切实了解群众需求,利用好多元主体,供给群众所需,即实现社区服务供给的精准化。而青少年群体处于成长的特殊阶段更加需要社区提供精准的服务,但是青少年在服务过程中相对于其他群体更难发
性别决定基因家族成员-2 sox2是SOX基因家族成员之一,与发育及细胞的分化与去分化相关。受sox2在诱导多能性干细胞相关方面研究的启发,本文以大鼠再生肝为材料,用液压转基因技术(hydrodynamics-based transgene, HDT),通过基因过表达和RNA干涉的方法,初步研究了sox2对大鼠肝再生过程的作用,为增加对sox2在大鼠肝再生中的作用和分子机理的认识提供了资料。本文根
大学生作为就业大潮中的主力军,分析他们的所需所求、研究他们的就业问题,有助于找出就业问题中难以解决的瓶颈问题,促成良好、和谐、稳健发展的大学毕业生就业环境。本文分析主流政策供给偏好方向,力图量化不同的政策因子对大学毕业生的吸引力度,进而发现在本科毕业生就业过程中的核心问题。以期能得到完善现行人才政策的启示。我国目前正处于转型阶段,以人才政策对于大学毕业生吸引力影响因子为主题的研究为切入点能够让我们
由于受诸多因素影响,我国癌症发病率不断增加,癌症患者数量也逐年增长。据2021年初世界卫生组织国际癌症研究机构发布的最新预估数据显示,2020年中国新发癌症457万人。即使每位癌症患者由一名家属照顾,我国每年也将新增400多万癌症患者家属。然而,在长期照护癌症患者的过程中,癌症患者家属会因高昂的治疗费用、对治疗效果的担忧、护理经验的匮乏和自我认同感的缺失等各种因素陷入焦虑、不安之中。于大部分癌症患
脂质运载蛋白2基因lcn2编码的小分子分泌型蛋白是脂质运载蛋白家族的成员之一,在细胞增殖、分化和凋亡等多种生理过程中起调节作用。为探讨lcn2过量或降低表达对肝脏再生的作用,本文以大鼠再生肝为材料,参照lcn2的mRNA序列信息设计克隆引物和带酶切位点引物,采用分子克隆技术得到lcn2的克隆载体,测序证实正确后,以其为模板,进一步将基因克隆到真核表达载体pEGFP-N1上,构建出表达载体pEGFP