【摘 要】
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目的观察磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路在大鼠高位脊髓损伤（SCI）早期心肌中的变化,初步探讨PI3K/Akt通路在高位脊髓损伤后心肌能量代谢中的作用及其与葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）在通路中的关系。方法1.清洁级雄性Sprague-Dawley大鼠30只,8-10周龄,体重250-300g,随机分成五组（n=6）:假手术组（Sham组）、高位SCI后4小时组（SCI
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目的观察磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路在大鼠高位脊髓损伤（SCI）早期心肌中的变化,初步探讨PI3K/Akt通路在高位脊髓损伤后心肌能量代谢中的作用及其与葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）在通路中的关系。方法1.清洁级雄性Sprague-Dawley大鼠30只,8-10周龄,体重250-300g,随机分成五组（n=6）:假手术组（Sham组）、高位SCI后4小时组（SCI 1组）、高位SCI后12小时组（SCI 2组）、高位SCI后24小时组（SCI 3组）和高位SCI后48小时组（SCI 4组）;2.改良的Allens打击法建立高位SCI大鼠模型,Sham组仅暴露颈7脊髓后缝合,建模成功后注意观察和记录各组动物术后表现,在相应时点用Basso-Beattie-Bresnahan（BBB）评分法评估大鼠下肢运动功能,选取相同部位的心肌组织进行下一步检测;3.透射电子显微镜观察各组样本中细胞的超微结构;4.免疫印迹法检测样本中PI3K、磷酸化Akt（p-Akt）和心肌细胞膜GLUT4含量;5.荧光定量PCR法检测样本中PI3K m RNA的表达。结果1.Sham组术后四肢灵活,活动等行为与术前基本一致,BBB评分为21分。SCI各组术中颈7打击处变灰暗,术后双下肢弛缓性瘫痪,活动和进食明显减少,无自主排尿排便;BBB评分均接近0,与Sham组比较差异有统计学意义（P<0.05）。2.透射电子显微镜结果显示:Sham组心肌细胞结构完整;SCI各组心肌细胞存在不同程度的肌丝溶解、肌浆网扩张、细胞间隙增宽、溶酶体增多和线粒体结构破坏等变化。3.免疫印迹法结果显示:与Sham组比较,SCI 1组、SCI 2组和SCI 3组心肌样本PI3K、p-Akt和心肌细胞膜GLUT4蛋白含量均降低（P0.05）。4.PCR结果显示:与Sham组比较,SCI 1组、SCI 2组和SCI 3组心肌样本中PI3K m RNA相对表达量降低（P0.05）。结论1.大鼠高位脊髓损伤后早期存在心肌超微结构损伤。2.大鼠高位脊髓损伤后早期即出现心肌PI3K和p-Akt表达降低,GLUT4转位减少,PI3K/AKT信号通路异常,其可能与高位SCI后心肌细胞胰岛素抵抗和葡萄糖代谢异常有关。
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