眼针调节脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织VEGF、Notch1、NICD、Hes1表达改善微血管密度的研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:foxmaj
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目的:观察眼针对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠缺血半暗带区脑组织VEGF、Notch1、NICD、Hes1及微血管密度(MVD)表达的影响,探讨眼针改善脑缺血再灌注损伤的机制。方法:将60只大鼠按照随机数字表法分为10只正常组、10只假手术组、40只造模组。假手术组大鼠采用钝性分离造成颈部肌肉的损伤并缝合。造模组大鼠采用改良的线栓法进行造模。在模型制备成功后,参照Longa 5分制评分标准进行神经功能缺损评分。在缺损评分完成后按照随机数字表法再次进行分组即模型组、眼针组、穴外针组。眼针组及穴外针组大鼠于脑缺血再灌注即刻、12h及取材前30min分别进行眼针治疗3次;针刺取穴分别为肝胆区、上焦区、下焦区、肾膀胱区。而穴外针组选择眼针组同名穴区外3mm处为针刺部位,刺法与眼针穴区相同。采用过量的麻醉药水合氯醛对大鼠进行处死。处死前每组大鼠再次进行神经功能缺损评分。处死大鼠取缺血半暗带区脑组织,采用免疫荧光标记法进行MVD的检测;采用Western blot法检测VEGF、Notch1、NICD、Hes1的蛋白表达水平。结果:1.眼针对CIRI大鼠的神经功能缺损评分的影响与假手术组比较,模型组、眼针组、穴外针组大鼠神经缺损评分显著升高(P<0.01),差异有统计学意义。与模型组比较,眼针组大鼠神经缺损评分显著降低(P<0.01),差异有统计学意义;穴外针组大鼠神经缺损评分无明显变化(P>0.05),差异无统计学意义。与眼针组比较,穴外针组大鼠神经缺损评分显著升高(P<0.01),差异有统计学意义。2.眼针对CIRI大鼠缺血半暗带区脑组织MVD的影响与假手术组比较,模型组、穴外针组缺血半暗带区脑组织CD31阳性细胞数明显减少(P<0.01),差异有统计学意义;眼针组缺血半暗带区脑组织CD31阳性细胞数明显增加(P<0.01),差异有统计学意义。与模型组比较,眼针组缺血半暗带脑组织CD31阳性细胞数明显增加(P<0.01),差异有统计学意义;穴外针组缺血半暗带区脑组织CD31阳性细胞数无明显变化(P>0.05),差异无统计学意义。与眼针组比较,穴外针组缺血半暗带区脑组织CD31阳性细胞数明显减少(P<0.01),差异有统计学意义。3.眼针对CIRI大鼠缺血半暗带区脑组织VEGF蛋白表达的影响与假手术组比较,模型组、穴外针组大鼠缺血半暗带区脑组织VEGF表达均显著下调(P<0.01),差异有统计学意义,眼针组大鼠缺血半暗带区脑组织VEGF表达无明显变化(P>0.05),差异无统计学意义;与模型组比较,眼针组大鼠缺血半暗带区脑组织VEGF表达显著上调(P<0.01),差异有统计学意义,穴外针组大鼠缺血半暗带区脑组织VEGF表达无明显变化(P>0.05),差异无统计学意义;与眼针组比较,穴外针组大鼠缺血半暗带区脑组织VEGF表达显著下调(P<0.01),差异有统计学意义。4.眼针对CIRI大鼠缺血半暗带区脑组织Notch1蛋白表达的影响与假手术组比较,模型组、眼针组、穴外针组大鼠缺血半暗带区脑组织Notch1表达均显著下调(P<0.01),差异有统计学意义;与模型组比较,眼针组大鼠缺血半暗带区脑组织Notch1表达显著上调(P<0.01),差异有统计学意义,穴外针组大鼠缺血半暗带区脑组织Notch1表达无明显变化(P>0.05),差异无统计学意义;与眼针组比较,穴外针组大鼠缺血半暗带区脑组织Notch1表达显著下调(P<0.01),差异有统计学意义。5.眼针对CIRI大鼠缺血半暗带区脑组织NICD蛋白表达的影响与假手术组比较,模型组、眼针组、穴外针组大鼠缺血半暗带区脑组织NICD表达均显著下调(P<0.01),差异有统计学意义;与模型组比较,眼针组大鼠缺血半暗带区脑组织NICD表达显著上调(P<0.01),差异有统计学意义,穴外针组大鼠缺血半暗带区脑组织NICD表达无明显变化(P>0.05),差异无统计学意义;与眼针组比较,穴外针组大鼠缺血半暗带区脑组织NICD表达显著下调(P<0.01),差异有统计学意义。6.眼针对CIRI大鼠缺血半暗带区脑组织Hes1蛋白表达的影响与假手术组比较,模型组、眼针组、穴外针组大鼠缺血半暗带区脑组织Hes1表达均显著下调(P<0.01),差异有统计学意义;与模型组比较,眼针组大鼠缺血半暗带区脑组织Hes1表达显著上调(P<0.01),差异有统计学意义,穴外针组大鼠缺血半暗带区脑组织Hes1表达无明显变化(P>0.05),差异无统计学意义;与眼针组比较,穴外针组大鼠缺血半暗带区脑组织Hes1表达显著下调(P<0.01),差异有统计学意义。结论:1.眼针能够增加CIRI大鼠缺血半暗带区脑组织的微血管密度。2.眼针能够通过上调CIRI大鼠缺血半暗带区脑组织VEGF、Notch1、NICD、Hes1的表达来改善微血管密度。
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