【摘 要】
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目的:查阅和整理相关文献,通过运用VOSviewer可视化分析软件,分析动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)在中医证候、发病机制及中西医治疗上的相关性,为实验研究提供理论依据。另一方面,构建动脉粥样硬化Apo E-/-小鼠脾气虚病证结合模型,揭示健脾通脉方通过缓解AS小鼠行为表现、血清脂蛋白及炎症因子水平,起到早期防治AS的作用,为临床早期防治动脉粥样硬化性疾病提供理论与实验依据。
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目,项目名称:基于“脾-营-脉相关”理论探讨健脾通脉方抑制血管平滑肌表型转化干预动脉粥样硬化的机制研究(No:81874417);
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目的:查阅和整理相关文献,通过运用VOSviewer可视化分析软件,分析动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)在中医证候、发病机制及中西医治疗上的相关性,为实验研究提供理论依据。另一方面,构建动脉粥样硬化Apo E-/-小鼠脾气虚病证结合模型,揭示健脾通脉方通过缓解AS小鼠行为表现、血清脂蛋白及炎症因子水平,起到早期防治AS的作用,为临床早期防治动脉粥样硬化性疾病提供理论与实验依据。材料与方法:1.理论研究:在中国知网数据库以关键词方式检索“动脉粥样硬化”“辨证”“证候要素”“发病机制”“炎症”“中药”“复方”等关键词,将文献导出为Refworks格式,用VOSviewer软件进行可视化分析。2.实验研究:将50只8周龄SPF级雄性Apo E-/-小鼠适应性喂养1周后随机分为5组,即模型组、JPTMF高剂量组、JPTMF中剂量组、JPTMF低剂量组、阿托伐他汀组(以下分别简称高剂量组、中剂量组、低剂量组、西药组),每组10只,喂饲高脂饲料,10只相同遗传背景8周龄SPF级雄性C57BL/6J作为正常组,喂饲普通饲料。模型组和正常组用等量的生理盐水灌胃,高剂量组、中剂量组、低剂量组、西药组分别给予等量的JPTMF高、中、低剂量、阿托伐他汀钙片溶液进行灌胃,JPTMF高、中、低剂量比例为3:1:1/3。适应性喂养一周后灌胃,连续灌胃12周,13周末进行取材。每周周一固定测量小鼠体重及饮食量1次,于第4、第7、第10、第13周对小鼠进行抓力测定、抗疲劳能力测定。第13周进行小鼠旷场实验、粪便含水率测定、血清胰淀粉酶含量测定。全自动生化分析仪检测各组小鼠血清LDL、HDL、TC、TG含量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠血清中IL-4、IL-6、IL-10和TNF-α的表达水平。HE染色法和油红O染色法观察小鼠主动脉形态学改变和脂质沉积情况。结果:1 VOSviewer可视化分析结果:AS与中医辨证及证候要素密切相关的关键词有气虚、痰浊、血瘀和脾虚等。常用治法有活血化瘀和益气活血等。与中医治疗密切相关的关键词有丹参,活血化瘀类中药;常用的方剂有复方丹参滴丸、血府逐瘀汤、补阳还五汤等。近年来关于AS的研究集中在胸痹、心血瘀阻、脾虚、脑卒中等。与发病机制密切相关的关键词有血脂、炎症、血管平滑肌细胞等。与炎症密切相关的关键词有巨噬细胞、氧化应激、C反应蛋白、TNF-α、IL-6、IL-10等,在治疗上与阿托伐他汀关系密切。2油红O结果显示:与正常组相比,模型组主动脉内有大量脂质沉积。与模型组相比,各用药组主动脉内脂质情况均有改善,以高剂量组最为明显。3 HE染色结果显示:与正常组相比,模型组主动脉结构发生紊乱,内膜不光滑,管壁中膜可见泡沫细胞,有明显粥样斑块形成。与模型组相比,高剂量组、中剂量组、西药组主动脉结构改善较为明显。4实验研究结果:连续12周的高脂饲料喂养后,与正常组小鼠相比,模型组Apo E-/-小鼠出现旷场实验活动范围、抓力、抗疲劳能力、饮食量及血清胰淀粉酶含量显著下降(P<0.01),粪便含水率显著升高、体重增长缓慢(P<0.01)等明显的脾气虚相关症状表现。同时,与正常组相比,模型组Apo E-/-小鼠血清HDL水平降低,LDL、TC、TG升高(P<0.01);血清抗炎因子IL-4、IL-10的表达水平下降,促炎因子IL-6、TNF-α的表达水平升高(P<0.01)。与模型组相比,JPTMF能够剂量依赖性改善Apo E-/-小鼠脾气虚及炎症反应情况,以高剂量组效果最佳(P<0.01),且疗效优于西药组。结论:1.动脉粥样硬化的发生发展与脾藏象功能密切相关,运用健脾益气活血法从脾论治动脉粥样硬化疗效显著。2.健脾通脉方能够通过提高血清HDL含量,降低血清LDL、TC、TG含量来改善Apo E-/-小鼠血脂水平。3.健脾通脉方干预AS的机制与改善Apo E-/-小鼠体内炎症反应,提高Apo E-/-小鼠血清中抗炎因子IL-4、IL-10水平,抑制促炎因子IL-6、TNF-α的水平有关。
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