脂肪干细胞来源的外泌体对角质细胞的影响

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目的 干细胞由于来源丰富,取材简单,低免疫原性等优点在组织工程及再生医学领域得到广泛的关注,近年来干细胞来源外泌体的旁分泌途径作用机制成为当前研究的重点和热点。大量研究表明干细胞来源外泌体具有促进组织修复和再生等功能,其可以避免干细胞移植所引起的免疫排斥反应等缺点,由此干细胞来源外泌体在组织修复领域中有巨大的应有前景。因此,本文研究脂肪干细胞来源外泌体对角质细胞的作用,旨在为干细胞来源外泌体对组织再生及修复的调控提供理论依据。方法 1.告知18~30岁有既往疤痕的二次剖宫产健康产妇相关试验事宜,签署知情同意书,收集其废弃皮下组织,从中提取脂肪干细胞并在电镜下鉴定;2.告知18~25岁需行包皮切除术的成年男子相关试验事宜,签署知情同意书,收集废弃包皮组织分离角质细胞并在电镜下鉴定;3.用SBI试剂法提取脂肪干细胞来源的外泌体,并通过纳米流式检测仪进行径粒分析和免疫印迹法对外泌体标记蛋白进行鉴定;4.不同浓度脂肪干细胞来源外泌体处理角质细胞,采用划痕法、CCK-8法、transwell法检测角质细胞的增殖和迁移情况,通过RT-PCR和ELISA试剂盒对角质细胞分泌的MMP-1(基质金属蛋白酶-1),IL-1α(白细胞介素-1α),TGF-β(转化生长因子-β)进行检测;5.构建小鼠创伤模型,并于3,5,7,14天对创伤部位进行包埋,切片,免疫组化检测MMP-1(基质金属蛋白酶-1),MMP-3(基质金属蛋白酶-3)的表达变化。结果 1.脂肪干细胞来源外泌体可促进角质细胞的增殖和迁移;2.脂肪干细胞来源外泌体可促进角质细胞分泌MMP-1,IL-1α,TGF-β;3.在动物实验中,脂肪干细胞来源外泌体在体内促进MMP-1,MMP-3的表达;结论 脂肪干细胞来源外泌体可促进角质细胞的增殖和迁移,调控分泌MMP-1,IL-1α,TGF-β的表达,并在体内促进MMP-1,MMP-3的表达;
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