满山香的质量标准控制和二氯甲烷部位的化学成分研究

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细梗香草(Lysimachia Capillipes Hemsl.)为报春花科珍珠菜属植物,又名满山香、香排草、毛柄珍珠菜,在江西、福建、浙江、湖南、广东、贵州等地区都有分布,但其主要生长在江西、福建、贵州等。“满山香”药材基源复杂,但细梗香草是唯一的草本“满山香”,满山香药材为细梗香草的干燥全草,于20世纪70年代初在江西省乐安县发现,是江西特色中草药资源。性甘、味平,主要功能是祛风、止咳、调经,常用来治疗感冒咳嗽、气管炎、哮喘、月经不调、神经衰弱等疾病。文献报道满山香药材中主要含黄酮、皂苷类成分和挥发性成分。因其香气浓郁持久,富含挥发性成分,常被民间用作火锅中的香料。满山香现行质量标准收载于《江西省中药材标准》(2014年版),检验项目包括性状,粉末显微鉴别、山柰素的薄层色谱鉴别,水分检查,浸出物,以山柰素为指标成分的HPLC法含量测定。因山柰素存在于许多药用植物中,以其作为指标成分建立的薄层色谱鉴别和含量测定,方法专属性差。课题组前期对满山香中黄酮类和皂苷类化学成分进行了相关研究,为进一步控制满山香药材的质量稳定性和一致性,课题组对满山香的质量标准进行了深入研究。本课题利用TLC法建立了以满山香为对照药材的薄层色谱鉴别,优化了山柰素的薄层色谱鉴别方法。采用HPLC法建立了满山香药材的指纹图谱,确定了12个共有色谱峰,指认了5个色谱峰,经对10批药材的HPLC图谱与对照指纹图谱进行验证,具有较好的一致性。建立了HPLC法同时测定满山香中槲皮素-3-O-(2′′,6′′-二-O-α-吡喃鼠李糖)-β-半乳糖苷和山柰酚-3-O-[2-吡喃葡萄糖基-(1→3)-吡喃鼠李糖-6-吡喃鼠李糖]-β-D-吡喃半乳糖苷2个黄酮苷的含量,方法:选SHIMADZU Shim-pack VP-ODS C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm),乙腈-0.3%磷酸溶液为流动相,线性梯度洗脱,流速为1.0 ml·min-1,检测波长为350 nm,分别在0.0414 6~2.072 8μg、0.0889 5~4.447 5μg内呈良好的线性关系,相关系数r=0.999 9、0.999 9。建立了HPLC法同时测定满山香中细梗香草皂苷B和细梗香草皂苷C 2个皂苷的含量,方法:选YMC-Pack ODS-A C18色谱柱(4.6×250mm,5μm),乙腈-0.3%冰醋酸溶液(44:56)为流动相,流速为1.0 ml·min-1,漂移管温度45℃,载气流速1.59 ml·min-1,分别在2.928 0~19.520 0μg、1.1826~7.884 0μg内呈良好的线性关系,相关系数r=0.999 3、0.999 5。所建立的方法操作简便、重现性好,专属性强。另外,还对满山香的灰分、总灰分、重金属及有害元素、有机氯农药残留和浸出物进行了相关研究,制定了合理的限度。另外,本课题组研究了满山香药材中二氯甲烷部分的化学成分,经过应用薄层色谱、硅胶柱、Sephadex LH-20柱、ODS柱以及HPLC等技术手段对不同组分进行分离纯化,得到25个化合物。分别为:10-eicosenoic acid(1)、dibutyl phthalate(2)、2-Tridecanone(3)、月桂酸(4)、Dodecyl(Z)-9-hexadecenoate(5)、油酸(6)、(R,Z)-21-methyl-8-pentatriacontene(7)、9(Z)-octadecenamide(8)、芥酸酰胺(9)、(10E)-Heptadec-10-en-1-ol(10)、cetyl triacontanoate(11)、1-Bromo-(8Z)-heptadecene(12)、棕榈酸(13)、oleamide(14)、cis-octadec-9-enoic acid(15)、pentatriacontane(16)、1H-imidazole-4-carboxylate(17)、o-phthalic acid bis-(2-ethyl decyl)-ester(18)、2-methyltridecane(19)、bis(2-ethylhexyl)benzene-1,2-dicarboxylate(20)、5,5’-dibutoxy-2,2’-bifuran(21)、2-aminoethyl tetradecanoate(22)、hentriacontanol(23)、decan-1-ol(24)、17-三十三酮(25),所有化合物均为首次从满山香中分离得到。
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