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目的:前列腺癌是男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤,发病率在美国高居首位。我国前列腺癌的发病率虽然低于欧美国家,但随着生活方式的改变及检出率的提高,我国前列腺癌的发病率已呈上升趋势。前列腺癌容易发生转移,内分泌治疗通过降低体内的雄激素水平,控制肿瘤生长,是治疗转移性前列腺癌的主要方法。但随着疾病进展,绝大多数患者对内分泌治疗的敏感性变差,最终发展为转移性去势抵抗性前列腺癌（metastatic castration-resistant prostate cancer,mCPRC）。目前,mCRPC 主要的治疗方式是在维持内分泌治疗的基础上联合全身化疗或新型内分泌治疗。尽管对mCRPC预后相关的预测因子很多,但仍然缺乏预测治疗效果的因子。上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）是肿瘤细胞转移的常见现象,通常发生在上皮细胞,表现为极性的丧失、黏附性降低、迁移能力增强。Vimentin是中间丝蛋白家族的主要成分,通常在间充质细胞中表达,以维持细胞完整性和抵抗压力而著称,E-cadherin属于跨膜糖蛋白家族,负责钙依赖性细胞间黏附,他们都被公认为EMT的重要标志。EMT过程中发生的特征性变化主要包括上皮分化标志物E-cadherin下调以及间质标志物Vimentin上调,上皮肿瘤细胞进入血循环,进而形成转移,这与肿瘤的耐药性和预后不良相关。最近的研究也发现,EMT与mCPRC的发生、进展以及药物抵抗有关。另外,循环肿瘤细胞（circulating tumor cells,CTC）是游离于外周血中所有肿瘤细胞的统称,它的数量在前列腺癌、乳腺癌、肺癌等多种肿瘤中被证实可以影响患者的预后。CTC进入外周血液循环的过程中会发生不完全的EMT,同时表达上皮细胞和间质细胞特征和标志物。因此我们推测,检测外周血中同时表达Vimentin和E-cadherin的细胞可以间接反映CTC的状况。基于上述理论,我们假设mCPRC患者外周血中Vimentin和E-cadherin的表达能预测患者对多西他赛治疗的耐药性和疗效,通过流式细胞学检测首次化疗前、化疗4周期后外周血中表达Vimentin和E-cadherin的细胞比值（表示为Vim/E-cad）以及同时表达Vimentin和E-cadherin的细胞比例（表示为Double）,检验其与多西他赛疗效之间是否存在相关性,探索多西他赛疗效的预测因子。方法:本项研究是一项前瞻性队列研究,实验对象为2015年11月至2019年6月在北京大学第一医院泌尿外科诊断为mCRPC、符合入组和排除条件并至少完成4周期多西他赛化疗的男性患者,于首次化疗前1周内、化疗4周期后1周内分别采集外周血7.5ml,对标本处理后加入Vimentin抗体和E-cadherin抗体,进行双荧光染色,随后采用流式细胞学检测血液标本中表达Vimentin或E-cadherin的细胞所占的比例。同时,收集入组患者的基线信息,包括年龄、ECOG评分、前列腺癌Gleason评分、前列腺TNM分期、转移部位、是否有严重的疼痛、既往治疗情况,以及首次化疗前1周内的血PSA值、血红蛋白计数、中心粒细胞计数、淋巴细胞计数、全身影像学评估结果;收集化疗4周期后的检查结果,包括血前列腺特异性抗原（prostate specific antigen,PSA）值、全身影像学评估结果。全部患者随访至出现所有的研究终点,包括PSA反应情况、PSA无进展生存期（PSA progression free survival,PSA-PFS）和临床无进展生存期（clinical progression free survival,cPFS）。采用用单因素分析、多因素分析以及生存曲线分析,检验化疗前外周血中基线Vim/E-cad、Double与化疗4周期后PSA反应、PSA-PFS和cPFS的相关性,并检验Vim/E-cad和Double在化疗前后的变化与PSA反应的关系,探索mCRPC患者外周血中Vimentin和E-cadherin的表达对于多西他赛疗效的预测价值。结果:本研究共入组79例患者,其中3例因不良事件或个人意愿未完成4周期化疗,2例因血液标本质量问题未能成功检测,最终入组的有效病例为74例。基线Vim/E-cad≤1和Vim/E-cad>1的患者分别为55例和22例;基线Double≤2%和Double>2%的患者分别为49例和25例。（1）基线Vim/E-cad≤1的52例患者中34例产生了 PSA反应（65.38%）,基线Vim/E-cad>1的22例患者中有6例产生了 PSA反应（27.27%）,基线Double≤2%的49例患者中32例产生了 PSA反应（65.31%）,基线Double>2%的25例患者中有8例产生了 PSA反应（32.00%）;在多因素分析中,基线Double是多西他赛治疗后PSA反应的独立影响因素（OR0.129,95%CI:0.029-0.573;P=0.007）,基线Double>2%的患者倾向于出现较差的PSA反应。（2）基线Vim/E-cad>1的患者在多西他赛治疗后倾向于出现更短的PSA-PFS（中位2.5个月vs 6.0个月,P<0.001）和更短的cPFS（中位4.5个月vs 8.0个月,P<0.001）;同样,基线Double>2%的患者在多西他赛治疗后倾向于出现更短的PSA-PFS（中位3.0个月vs 6.0个月,P=0.012）和更短的cPFS（中位6.0个月vs 7.5个月,P=0.007）。在多因素分析中,基线Vim/E-cad>1是多西他赛治疗后出现更短的PSA-PFS（HR=2.217,95%CI:1.287-3.821;P=0.004）和更短的 cPFS（HR=2.632,95%CI:1.507-4.599;P=0.001）的独立影响因素。（3）在基线Vimentin和E-cadherin与临床特征关系的分析中显示,Gleason评分与基线Vim/E-cad和基线Double具有相关性,并且是基线Vim/E-cad的独立影响因素（HR0.228,95%CI:0.063-0.826;P=0.024）。（4）在多西他赛疗效的影响因素分析中显示,既往是否口服阿比特龙（OR0.037,95%CI:0.003-0.447;P=0.009）和基线血红蛋白值（OR7.964,95%1.772-35.803;P=0.007）是化疗4周期后PSA反应的独立影响因素,未进行既往治疗或血红蛋白≥120g/L的患者倾向于出现较好的PSA反应;（5）Vimentin和E-cadherin表达在多西他赛化疗前后的变化与PSA反应无关,不能预测化疗疗效,而它们的基线表达情况对于疗效的预测更有价值。结论:我们建立了一种可靠的流式细胞学检测外周血EMT标志物的方法,证实mCRPC患者外周血中Vimentin和E-cadherin的表达可以预测多西他赛的疗效,其预测效能值得在大规模的临床试验和长期的临床观察中进一步探索。