肝纤维化是由病毒感染、先天性代谢缺陷、化学毒物以及自身免疫异常等原因引起慢性肝损伤的一种共同病理表现,也是机体对慢性肝损伤的一种修复反应。目前还没有被批准应用于临床的特效药物,所以对于研究其发病机制及寻找潜在的干预靶点变得极为迫切和重要。肝血窦毛细血管化与血管新生在肝纤维化进程中扮演着重要的作用,但是其机制尚未完全阐明清楚。本课题以实验室新发现的LECT2/Tie1信号通路为基础,探讨了其在调控肝血窦毛细血管化与血管新生及肝纤维化进程的作用和机制,为肝纤维化治疗提供了新的策略和理论基础。研究首先发现,白细胞趋化因子2（Leukocyte cell-derived chemotaxin 2,LECT2）在代谢相关脂肪性肝病（Metabolic associated fatty liver disease,MAFLD）病人血清及肝组织样本中表达上调,通过构建多种小鼠慢性肝损伤模型,观察到在野生型（WT）小鼠肝脏出现纤维化损伤时LECT2表达也会上调,而全身性Lect2基因敲除（Lect2-KO）小鼠肝纤维化症状则显著减轻,表明LECT2具有促进肝脏纤维化的作用。利用免疫荧光共定位技术及原代细胞体外实验发现,纤维化时主要表达LECT2的细胞为肝细胞和血管内皮细胞。利用CD31对纤维化肝组织染色发现LECT2在体内对肝内血管具有明显的调控作用:减少汇管区/损伤区周围新生血管数量,促进肝血窦毛细血管化。与野生型（WT）小鼠相比,在Lect2-KO小鼠肝纤维化的汇管区/损伤区可见更多的CD31和VEGFR2双阳性血管。体外细胞实验发现,重组人LECT2蛋白可抑制EA.hy926细胞及原代肝血窦内皮细胞迁移以及成管能力。进一步机制研究发现,LECT2与血管内皮细胞表面受体 Tie1（Tyrosine kinase with immunoglobulin like and EGF like domains 1）的胞外Ig3结构域直接结合,并依赖结合发挥调控血管内皮细胞功能的作用。通过表面等离子体共振（SPR）、交联质谱（XL-MS）和免疫共沉淀（Co-IP）等一系列的实验相互结合,我们进一步找到了 LECT2与Tie1相互作用的关键氨基酸位点,这为后续将抑制两者结合作为靶点干预肝脏纤维化的研究提供了可行性。通过转录组测序比较WT与Lect2-KO小鼠纤维化肝脏中基因表达量的差异,发现PPARγ/MMP信号通路发生了显著变化,LECT2/Tie1信号可以激活PPARγ/MMP信号通路,促进TGF-β1等因子分泌继而活化肝星状细胞,促进胞外基质蛋白分泌,同时下调基质金属蛋白酶MMPs,使得VE-cadherin及胞外基质降解减少,增强内皮细胞之间的连接并增加了胞外基质堆积,抑制血管内皮细胞迁移和血管新生并促进肝血窦毛细血管化,最终促进肝纤维化进程。我们的研究从发现白细胞趋化因子LECT2在肝脏纤维化进展中的作用入手,找到了 LECT2行使功能的关键受体Tie1,明确了两者相互作用的关键氨基酸位点,探讨了 LECT2/Tie1信号在肝脏纤维化中发挥作用的下游机制,为靶向LECT1/Tie1信号治疗肝纤维化提供了坚实的理论和实验基础。