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本文利用酸氧化方法,获得羧基化碳纳米管,进而通过羧基进行衍生化得到功能化碳纳米管。通过红外、透射电镜、原子力显微镜、拉曼光谱、紫外吸收光谱等手段对碳纳米管进行了表征。进而我们通过非标记动态实时细胞分析系统(RTCA)、乳酸脱氢酶活力法、MTT比色法三种方法分别检测了碳纳米管样品的细胞毒性。 本文的主要结论是: 1.利用RTCA系统,无须标记,对细胞无创伤性,全过程自动、实时检测细胞的生长状态。实验结果表明水溶性碳纳米管对3T3细胞的毒性作用大小如下:SWNTs>MWNTs>MWNT-Lys。结果表明,经过赖氨酸修饰的碳纳米管能够显著降低碳纳米管的细胞毒性,并且碳纳米管毒性强度依赖很多因素,包括浓度、直径、作用时间和修饰基团等。 2.通过生化酶学法,检测黑色素瘤细胞培养液中胞浆酶一乳酸脱氢酶(LDH)的释放水平。结果表明:单壁碳纳米管和多壁碳纳米管对黑素细胞具有较明显的细胞毒性,与之共培养的细胞形态上发生较大改变,细胞发生不同程度变形,细胞排列稀疏,细胞透明度下降。随着碳纳米管剂量的升高,细胞膜完整性的损伤作用随之增强,具有明显的剂量-效应关系,相同剂量下,单壁碳纳米管的细胞膜损伤作用强于多壁碳纳米管。 3.MTT(四唑盐)比色法细胞毒性实验结果表明,长径比不同的单壁碳纳米管对人肺癌细胞毒性有较大差异。在SWNTs与细胞作用初期(24h),碳纳米管还没能及时进入细胞内,颗粒包裹在细胞外部,尺寸颗粒越大包裹越强,阻断了细胞通道,因此大颗粒表现出较强的细胞毒作用。随着作用时间的延长,小尺寸颗粒更容易深入到细胞内部,因此作用时间越长,进入细胞的小尺寸颗粒越多,因而小颗粒表现更强的细胞毒性作用。并且随着SWNT浓度的增加,作用时间的延长,细胞毒性作用也是增强的,有明显的量效关系。