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本文以鼓槌石斛为材料,从肠道粘膜免疫活性出发研究鼓槌石斛的各个组分,通过将鼓槌石斛多糖的提取、分离、纯化和免疫活性筛选相结合,获得了均一的多糖组分(DCP-F4),优化了鼓槌石斛多糖的提取分离方法,对鼓槌石斛各组分进行了理化性质的测定,并对均一的高活性多糖的初级结构的进行分析,为鼓槌石斛多糖的构效关系的研究奠定了基础。实验结果如下:(1)均一活性多糖的获得:将鼓槌石斛干粉按照酒精醇提、热水浸提、醇沉、脱蛋白、透析的步骤依次提取、分离,对得到的提取物DCE-A(7.48%),DCE-B(7.93%),DCE-C(7.14%),DCE-D(4.67%),DCP(3.72%)进行肠免疫活性初步筛选。接着对DCP进行酒精分级醇沉、阴离子交换柱分离、葡聚糖凝胶柱分离结合活性筛选得到高活性组分DCP-F4。(2)鼓槌石斛多糖的肠道免疫活性:鼓槌石斛多糖的各提取物都具有很好体外肠道免疫活性,粗提取物作用组的骨髓细胞增殖率提高了3.3%-89.0%,通过逐级的分离,鼓槌石斛多糖含量越来越高,且肠道免疫活性也越来越高。粗多糖用60%的乙醇沉淀下来的多糖组分(DCP-2)的肠免疫活性较其他两个组分更好,在实验浓度范围内,骨髓细胞的增殖率在44.8%-91.4%。DCP-2进一步分离得到的各组分中以水洗糖的促进作用最强,骨髓细胞的增值率为56.1%-95.7%。水洗糖通过分离得到的组分中DCP-F4的活性最佳,对骨髓细胞的促进作用为对照组的2.136倍。(3)鼓槌石斛均一多糖理化性质测定:DCP-F4的碳水化合物含量为94.32%,糖醛酸含量为1.85%,重均分子量为1.37×104Da,多分散系数为1.1497。DCP-F4的傅里叶红外分析具有多糖的标志吸收峰。样品的DSC分析表明多糖仅有一个122℃吸收热和316℃放热峰。多糖的单糖组成是由Xyl、Man、Glc构成的,比例为依次为1:7:16;单糖组成分析结合核磁分析,它们的一级结构大致是以1,4-Linked Manp和1,4-Linked Glcp为主链,支链由1,4,6-Linked Manp分支形成,端基主要有T-Linked Xyl、T-Linked Glcp形成的糖链单元。