尿囊素对Compound48/80诱导的假性过敏的改善作用及机制研究

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:meiyin1109
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
Compound48/80(C48/80)和P物质(SP)等许多刺激物可直接激活过敏性疾病的关键效应器肥大细胞(MC),这些物质通过直接激活肥大细胞上的Mas相关G蛋白偶联受体X2(MRGPRX2)从而导致其脱颗粒,引起非Ig E依赖机制介导的假性过敏。目的:本研究采用C48/80诱导的RBL-2H3细胞模型及小鼠被动皮肤过敏反应(PCA)模型、小鼠全身主动系统过敏反应(ASA)模型研究了尿囊素对假性过敏的影响,并对其作用机制进行初步研究。方法:体外实验:1、MTT法检测RBL-2H3细胞活力;2、分光光度法测定C48/80刺激的RBL-2H3细胞培养上清液中β-氨基己糖胺酶(β-Hex)的释放量;3、观察及检测C48/80刺激的RBL-2H3细胞脱颗粒的相关指标:(1)ELISA法测定细胞培养上清液中组胺(HIS)、IL-8、TNF-α、MCP-1的含量;(2)甲苯胺蓝染色法观察肥大的细胞形态;(3)iFluor488荧光染色法观察细胞膜结构的F-actin;(4)Hoechst33258染色法观察细胞凋亡情况;(5)Fluo-4-AM染色法检测细胞内钙离子浓度;(6)Western blot法检测与假性过敏反应相关蛋白P-PI3R/P-PLCγ的表达。体内实验:1、C48/80诱导建立小鼠PCA模型:(1)分光光度法测定小鼠皮肤组织中伊文思蓝的含量;(2)游标卡尺测量小鼠足趾肿胀厚度并计算其足趾肿胀率;(3)游标卡尺测量小鼠背部皮肤蓝斑直径;(4)HE染色和甲苯胺蓝染色法观察小鼠皮肤组织的病理改变及肥大细胞的分布。2、采用C48/80诱导建立小鼠ASA模型:(1)体温计测量小鼠肛温;(2)ELISA法测定小鼠血清中HIS、IL-8、TNF-α的含量。结果:体外实验:1、尿囊素对RBL-2H3细胞活力的影响结果表明,不同浓度尿囊素(0μM、3.75μM、7.5μM、15μM、30μM、60μM、120μM)对RBL-2H3细胞活力无显著性影响。2、尿囊素对C48/80刺激的RBL-2H3细胞上清中β-Hex释放量的影响结果表明,尿囊素30μM和60μM浓度能够显著抑制细胞上清液中β-Hex的释放量。3、尿囊素对C48/80刺激的RBL-2H3细胞脱颗粒的影响(1)ELISA实验结果表明,尿囊素30μM和60μM浓度能够显著降低C48/80刺激的RBL-2H3细胞上清液中HIS、IL-8、TNF-α、MCP-1的含量;(2)甲苯胺蓝实验结果表明,尿囊素30μM和60μM浓度能够抑制C48/80刺激的RBL-2H3细胞形态的改变;(3)i Fluor488荧光染色实验结果表明,尿囊素30μM和60μM浓度可以改善C48/80刺激的RBL-2H3细胞中膜结构F-actin的重组;(4)Hoechst33258染色实验结果表明,尿囊素30μM和60μM浓度可以抑制C48/80刺激的RBL-2H3细胞的凋亡;(5)Fluo-4-AM染色实验结果表明,尿囊素30μM和60μM浓度可以降低C48/80刺激的RBL-2H3细胞内钙离子浓度;(6)Western blot实验结果表明,尿囊素30μM和60μM浓度能够降低C48/80刺激的RBL-2H3细胞中假性过敏相关蛋白P-PI3R/P-PLCγ的表达,其中60μM能显著降低P-PI3R/P-PLCγ的蛋白的表达。体内实验:1、尿囊素对C48/80诱导的小鼠PCA模型的影响(1)实验结果表明,尿囊素25mg/kg和50mg/kg给药组可显著降低小鼠背部皮肤和足趾皮肤组织中伊文思蓝的外渗。足趾肿胀率和背部皮肤伊文思蓝渗出蓝斑直径的结果表明,尿囊素25mg/kg和50mg/kg给药组能显著降低小鼠的足趾肿胀率和直径。(2)HE染色结果表明,尿囊素25mg/kg和50mg/kg给药组可降低炎性细胞的浸润。甲苯胺蓝染色结果表明,尿囊素25mg/kg和50mg/kg给药组能降低位于足趾皮肤和背部皮肤中的肥大细胞脱颗粒。2、尿囊素对C48/80诱导的小鼠ASA模型的影响实验结果表明,尿囊素25mg/kg和50mg/kg给药组可显著增高ASA小鼠体温。此外,尿囊素25mg/kg和50mg/kg给药组能显著降低模型组小鼠血清中组胺(HIS)、TNF-α、IL-8和MCP-1的含量。结论:尿囊素在体内外均对假性过敏反应具有较强的抑制作用,这可能与抑制Ca2+/PLCγ/IP3R信号通路有关,表明尿囊素可能用于非Ig E介导的抗过敏和抗炎疾病的治疗。
其他文献
为提高钢-UHPC组合结构的延性,本文提出一种采用装配式栓钉连接的钢-UHPC组合板。设计并完成了不同抗剪连接程度的组合板的抗弯性能试验,分析了组合板试件破坏形态、极限承载力、刚度、裂缝发展规律和板端滑移,并与采用焊接栓钉的钢-UHPC组合板进行了对比分析,讨论了组合板试件的可拆卸性,最后对其极限抗弯承载力和抗弯刚度进行了理论分析并推导了计算公式。结果表明:装配式栓钉连接的钢-UHPC组合板破坏模
目的 分析脊髓亚急性联合变性患者的临床表现、病史、电生理检查结果、影像学检查、实验室检查结果、治疗方法及病情转归情况。方法 回顾性分析2016年4月—2021年4月福建医科大学省立临床医学院/福建省立医院神经内科收治的40例脊髓亚急性联合变性患者的临床资料,根据患者病程分为短病程组18例(病程≤6个月)、长病程组22例(病程> 6个月);随访6个月,比较入院时、随访6个月时患者的神经功能缺损评分变
人工智能时代,现代电子和交互式媒体蔓延至儿童的生活中,为儿童和家长带来便利的同时也带来了风险。本文首先对市场上流通的电子媒介及儿童的使用现状进行阐述,进而分析电子媒介给儿童社会性、认知、健康、情绪等方面带来的消极影响,并提出适当性、契机性、联系性、陪伴性四条电子媒介使用指导原则及相应的对策建议。
反比例函数是初中数学函数部分较为重要的内容,随着新课改的不断深入,在近几年的中考试题中,出现运用反比例函数的图象和性质对几何图形进行探究以及反比例函数为背景的实际运用问题.对于这类问题,如果能正确掌握解题方法和技巧,处理起来就能轻松找到解题思路.有关反比例函数与几何综合问题的处理思路:从关键点入手,将函数特征和几何特征进行转化、组合、列方程组求解.
<正>一、考题呈现(2019年江苏省苏州市中考题)已知矩形ABCD中,AB=5cm点P为对角线AC上的一点,且AP=■cm.如图1,动点M从点A出发,在矩形上沿着A→B→C的方向匀速运动(不包含点C).设动点M的运动时间为t(s),APM的面积为S(cm~2),S与t的函数关系如图2所示.
期刊
教科书是学生、文化知识和教师之间互动的媒介,教师在进行教学之前要潜心钻研教科书,研究不同版本的异同,找出不同版本的精华,才能将精华部分融会贯通,及时调整教学策略,更新教学方法,提高教学效率。而函数是中学数学的重要内容,非常具有代表性,将函数内容作为比较对象,能反映出两版教材的编写特点,进一步为使用这两版教材的教师和学生提供一定的帮助。通过整理初中数学函数内容相关文献,将函数细分为函数概念、一次函数
慢性萎缩性胃炎可归属于中医学“虚痞”范畴。田德禄教授结合多年临床经验,认为本病以脾虚为本,食积、痰热、血瘀抟结为患;病位在胃,日久累及肝脾肾等脏腑;病情演化,初起病在腑、在气、在中焦,病久入脏、入血、入下焦;实邪为主,当清降和胃,祛实邪;脾虚为重,当甘平养胃,益脾气。附验案1则以佐证。
<正>我的记性越来越不好,还时不时对一部电影进行某种剪辑重组。看过两遍《隐入尘烟》,依旧是把那棵孤零零的麦穗当成结尾的定格镜头回想。直到第三遍看完,那真正的结局才被挪到正确位置上。先说那棵麦穗,它本来是插在麦秆编的小草驴身上,举着它的,是躺在自家炕上为失去妻子神伤的马老四。画面一转,它便像脱离开马老四的手一般,孤悬于空,像在与虚在远处的高楼大厦对望。
期刊