目的:通过水蛭素(Hirudin)对转化生长因子-β1(Transforming growth fac tor-β1,TGF-β1)刺激的人胚肺成纤维细胞MRC-5 TGF-β1/Smads信号通路的研究,探讨其对TGF-β1活化肺成纤维细胞(Lung fibroblast,LFB)机制的影响,以期为中医药治疗肺纤维化(Pulmonary Fibrosis,PF)提供实验依据。方法:体外培养MRC-5细胞,水蛭素作为实验药物,随机分为对照组、TGF-β1组(TGF-β1 10ng/ml诱导24h)、水蛭素低浓度组A(TGF-β1 10ng/ml诱导24h后给予水蛭素0.1562mmol/L)、水蛭素中浓度组B(TGF-β1 10ng/ml诱导24h后给予水蛭素0.3125mmol/L)、水蛭素高浓度组C(TGF-β1 10ng/ml诱导24h后给予水蛭素0.625mmol/L)五组。CCK-8法检测细胞增殖;RT-PCR、Western Blotting检测TGF-βRⅡ、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle action,α-SMA)、Smad 3、Smad 7 mRNA及蛋白表达;免疫荧光法测Ⅰ型胶原(collagen-Ⅰ,Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(collagen-Ⅲ,Col-Ⅲ)含量。成果:水蛭素可以抑制MRC-5增殖;同对照组相比,TGF-β1组可明显上调TGF-βRⅡ、α-SMA、Smad 3 mRNA及蛋白水平表达,下调Smad 7 mRNA及蛋白表达,并增加Col-Ⅰ、Col-Ⅲ分泌;同TGF-β1组进行比较,水蛭素各组呈浓度依赖性下调TGF-βRⅡ、α-SMA、Smad 3 mRNA及蛋白表达,上调Smad 7 mRNA及蛋白表达,并减少Col-Ⅰ、Col-Ⅲ分泌。结论:水蛭素能够抑制TGF-β1诱导MRC-5的增殖、胶原蛋白合成,调控TGF-β1/Smads信号通路,从而抑制TGF-β1活化肺成纤维细胞,发挥抗肺纤维化的作用。其机制可能是通过抑制TGF-βRⅡ、α-SMA、Smad 3 mRNA及蛋白表达,上调Smad 7 mRNA及蛋白表达,降低Col-Ⅰ、Col-Ⅲ分泌来实现。