研究目的在体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)中,子宫内膜容受性(Endometrial receptivity,ER)受损被认为是胚胎植入失败的主要原因。影响ER的潜在因素众多,但已有研究多局限于子宫腺上皮组织,对内膜细胞外基质和血管的研究甚少。本课题研究卵巢高反应患者高雌、孕激素是否影响围种植期子宫内膜胶原合成及相关基因表达并探究子宫动脉血流增高的反复种植失败(recurrent implantation failure,RIF)患者是否存在血管生成相关因子的差异表达及可能的调节机制。研究方法比较刺激周期组(stimulated cycles,SC)和自然周期组(natural cycles,NC)接受IVF助孕的妇女子宫内膜胶原含量和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases)2和9(MMP2,9)/基质金属蛋白酶抑制蛋白(tissue inhibitors of metalloproteinases)1和3(TIMP1,3)的表达。体外培养人子宫内膜基质细胞细胞系(human endometrial stromal cells,HESCs),浓度梯度添加雌激素和孕激素及相应受体拮抗剂,在RNA和蛋白水平检测MMP2,9和TIMP1,3的表达变化。比较子宫动脉血流阻力增高的RIF组和对照组妇女血管生成素样蛋白4(Angiopoietin-like protein 4,ANGPTL4)的血清浓度和内膜表达情况。体外诱导HESCs蜕膜化观察蜕膜化前后ANGPTL4及上游过氧化物酶体增殖物激活受体γ(proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)表达变化。罗格列酮(PPARγ激动剂)对HESCs和人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)ANGPTL4及PPARγ表达作用。通过si RNA敲低ANGPTL4及添加罗格列酮进行细胞增殖实验、划痕实验、血管生成实验观察ANGPTL4对HUVECs增殖、迁移和体外血管生成的影响。研究结果改良Masson染色结果显示SC组内膜基质中的胶原蛋白分布比NC组更致密,胶原密度百分比更高。SC组MMP2和MMP9的m RNA和蛋白表达水平显著低于NC组,而TIMP1和TIMP3表达量显著升高。雌激素可以通过雌激素受体以剂量依赖的方式增加MMP2,9的表达而孕激素通过孕激素受体以剂量依赖的方式减少MMP2的表达。与之相反,TIMP1,3表达随着雌激素剂量的增加而降低而随着孕激素剂量的增加而增加。与对照组相比,子宫动脉血流阻力增高的RIF妇女围种植期间子宫内膜ANGPTL4的表达和内膜日ANGPTL4血清水平均降低。HESCs在体外诱导蜕膜化后,PPARγ和ANGPTL4的表达上调。罗格列酮可以通过PPARγ促进HESCs和HUVECs中ANGPTL4的表达和分泌。罗格列酮可通过ANGPTL4可以促进HUVECs的增殖,迁移和血管生成。结论卵巢高反应导致IVF-ET妇女围种植期的雌孕激素水平升高,刺激围种植期子宫内膜胶原蛋白的过度合成,导致子宫内膜容受性受损,影响胚胎种植,其机制可能与孕激素通过孕激素受体下调MMP2及上调TIMP1,3的表达有关。子宫动脉高血流阻力的反复种植失败妇女围种植期子宫内膜组织ANGPTL4的表达和内膜日ANGPTL4血清水平下降。罗格列酮通过PPARγ促进ANGPTL4的表达并促进血管生成,改善子宫内膜容受性,从而有利于胚胎着床。