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目的:成功建立小鼠视网膜缺血-再灌注（ischemia-reperfusion,IR）损伤模型,观察IR损伤后,视网膜细胞、视网膜功能及SIRT1蛋白表达的变化。方法:取成年雄性C57BL/6J小鼠,左眼经前房穿刺后,不进行生理盐水灌注,作为对照组;右眼经前房穿刺后,给予生理盐水灌注1小时,并分别于IR损伤后3、7和14天取材作为IR3、IR7和IR14组。记录造模前中后眼压的变化。取视网膜切片和铺片进行Brn3a免疫荧光染色,标识视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）。取视网膜铺片进行Iba1免疫荧光染色,标识小胶质细胞。对小鼠进行闪光视网膜电图（flash electroretinogram,F-ERG）检测,反映视网膜功能。取视网膜组织进行蛋白质免疫印迹实验,检测SIRT1蛋白表达水平。结果:（1）眼压结果显示:右眼造模前眼压为7.6±1.1 mm Hg,前房灌注使眼压升高至64.0±3.2 mm Hg,维持1小时后拔除针头,眼压立刻降至6.4±0.9 mm Hg,之后维持在正常范围无明显波动。（2）Brn3a免疫荧光染色和计数结果显示:IR损伤后,随着时间的延长,RGCs数目减少、排列紊乱。IR3、IR7和IR14组RGCs存活率分别为55.9%（P<0.05）、42.3%（P<0.05）和36.3%（P<0.05）。（3）Iba1免疫荧光染色结果显示:IR损伤后,随着时间的延长,小胶质细胞数目增多。IR3组和IR7组小胶质细胞由分支状静息态活化为阿米巴样激活态;IR14组小胶质细胞胞体不大,胞突较短。（4）F-ERG结果显示:IR损伤后7天时,a波和b波振幅均明显下降（P<0.01）。（5）SIRT1蛋白表达结果显示:IR损伤后,随着时间的延长,SIRT1蛋白表达下降,以IR7组和IR14组最为显著（P<0.05）。结论:视网膜IR损伤是以青光眼为代表的视网膜神经退行性病变最常用的研究模型,该模型稳定且成功。RGCs丢失、小胶质细胞活化增多和视网膜功能受损是视网膜IR损伤模型最主要的病理改变,同时伴随着SIRT1蛋白表达的下降,提示SIRT1可能参与了视网膜IR损伤的关键过程。目的:小鼠玻璃体腔注射白藜芦醇（resveratrol,RSV）和Sirtinol,并建立视网膜缺血-再灌注（ischemia-reperfusion,IR）损伤模型,观察给药对SIRT1蛋白表达、视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）及视网膜功能的影响,探讨RSV的神经保护作用是否通过SIRT1相关途径介导。方法:取成年雄性C57BL/6J小鼠,部分鼠右眼IR损伤后7天取材作为IR7组。其它鼠右眼造模前1天给予玻璃体腔注射PBS、10、50、100μM RSV和100μM Sirtinol,并于IR损伤后7天取材作为PBS+IR7、10RSV+IR7、50RSV+IR7、100RSV+IR7、100RSV+100Sirtinol+IR7和100Sirtinol+IR7组。记录玻璃体腔注射前后及造模前中后眼压的变化。取视网膜组织进行蛋白质免疫印迹实验,检测SIRT1蛋白表达水平。取视网膜切片和铺片进行Brn3a免疫荧光染色,标识RGCs。对小鼠进行闪光视网膜电图（flash electroretinogram,F-ERG）检测,反映视网膜功能。结果:（1）眼压结果显示:玻璃体腔注射前后眼压均处于正常范围,1天后前房灌注使眼压升高至65.8±2.6 mm Hg,维持1小时后拔除针头,眼压立刻降低,之后维持在正常范围无明显波动。（2）SIRT1蛋白表达结果显示:与IR7组相比,RSV以剂量依赖性方式上调SIRT1蛋白表达（P<0.05）。与100RSV+IR7组相比,RSV和Sirtinol共注射使SIRT1蛋白表达下降（P<0.05）。（3）Brn3a免疫荧光染色和计数结果显示:与IR7组相比,RSV以剂量依赖性方式提高RGCs存活率,以100μM最为显著（P<0.05）。与100RSV+IR7组相比,RSV和Sirtinol共注射使RGCs存活率下降（P<0.05）。（4）F-ERG结果显示:与IR7组相比,100μM RSV使b波振幅明显升高（P<0.01）。结论:玻璃体腔注射操作不影响视网膜IR损伤模型的建立。通过玻璃体腔注射RSV和Sirtinol可调控SIRT1蛋白表达水平。RSV以剂量依赖性方式延缓RGCs的丢失,并有效改善视网膜功能,以上作用均可被Sirtinol阻断。提示RSV对视网膜IR损伤具有神经保护作用,该作用通过SIRT1相关途径介导。目的:通过玻璃体腔注射白藜芦醇（resveratrol,RSV）和Sirtinol对SIRT1蛋白表达进行调控,并建立小鼠视网膜缺血-再灌注（ischemia-reperfusion,IR）损伤模型,观察给药对凋亡形态学和生化学的影响,探讨SIRT1介导的RSV神经保护作用是否通过抑制凋亡相关途径实现。方法:取成年雄性C57BL/6J小鼠,部分鼠左眼前房穿刺后不进行灌注作为对照组;右眼IR损伤后7天取材作为IR7组。其它鼠右眼造模前1天给予玻璃体腔注射PBS、10、50、100μM RSV和100μM Sirtinol,并于IR损伤后7天取材作为PBS+IR7、10RSV+IR7、50RSV+IR7、100RSV+IR7、100RSV+100Sirtinol+IR7和100Sirtinol+IR7组。取视网膜组织进行蛋白质免疫印迹实验,检测phosphoAkt（p-Akt）、Akt、Bax和Bcl-2蛋白表达水平。取视网膜切片进行cleaved caspase-3免疫荧光染色和TUNEL染色。结果:（1）蛋白质免疫印迹实验结果显示:与IR7组相比,玻璃体腔注射RSV使p-Akt蛋白表达升高（P<0.05）,使Bax蛋白表达下降（P<0.05）,以上变化均可被Sirtinol阻断（P<0.05）。Akt和Bcl-2蛋白表达无明显改变。（2）视网膜切片荧光染色结果显示:与对照组相比,IR损伤后cleaved caspase-3阳性和TUNEL阳性细胞增多。与IR7组相比,玻璃体腔注射RSV使cleaved caspase-3阳性和TUNEL阳性细胞减少,以上变化均可被Sirtinol阻断。结论:RSV及其靶点SIRT1对视网膜IR损伤的神经保护作用通过抑制凋亡相关途径实现。玻璃体腔注射RSV后,通过上调SIRT1蛋白表达,使Akt磷酸化为有活性的p-Akt,进一步下调Bax蛋白表达,抑制线粒体相关凋亡途径,减少cleaved caspase-3的产生,最终阻止DNA断裂的发生。该保护通路可被Sirtinol阻断。