论文部分内容阅读
目的：为了研究多药耐药基因MRP1在非小细胞肺癌中表达的差异，以及观察siRNA干扰技术是否能有效抑制非小细胞肺癌耐药细胞株中M RP1的表达，探讨体外高效和特异逆转肺癌耐药的策略。方法：运用实时荧光定量PCR、免疫组化法检测30例NSCLC组织及癌旁组织标本中耐药基因MRP1mRNA及其蛋白的表达水平，并且以MRP1为靶标设计合成siRNA，直接转染入A549/DDP，转染前后用实时荧光定量PCR检测MRP1mRNA表达水平，用Western blot检测MRP1蛋白的表达，MTT法检测A549/DDP对顺铂耐药性的变化。结果：1.在30例病理组织中，MRP1蛋白在肺癌组织中的阳性率为70%（21/30），癌旁组织中的阳性率为16.67%（5/30），表达有统计学差异(P<0.05)；对于癌组织，MRP1蛋白在已经化疗的病理组织中阳性率为90.9%(10/11)，在未化疗的病理组织中阳性率为57.89%(11/19)，计算两者有统计学差异(P<0.05)，说明MRP1在已化疗的组织中高表达。而且PCR结果显示MRP1mRNA在癌组织中的表达也高于癌旁组织，经过统计学分析有明显差异(P<0.01)。2.体外实验中A549/DDP转染MRP1siRNA后,MRP1mRNA表达明显降低，和转染前相比较有显著性差异(P<0.05)，抑制率达到了78%。转染后MRP1蛋白相对表达强度从之前的0.820±0.037降低为0.435±0.042有明显差异(P<0.05)；MTT结果显示转染后A549/DDP对顺铂的敏感性增加了1.43倍。结论：1.多药耐药基因MRP1在肺癌组织中的高表达,且MRP1蛋白在化疗的非小细胞肺癌组织中表达高于未化疗组织，说明在非小细胞肺癌患者中存在原发性耐药。2.体外实验证实了在耐药细胞转染MRP1siRNA后MRP1的转录和翻译都受到了不同程度的抑制，也使其对顺铂的药物敏感性增强，从一定程度上说明了逆转耐药。