RNA干扰A549细胞核干细胞因子基因表达

来源 :西部医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：guojiaguangdian

【摘要】

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目的探讨A549细胞株NS基因的表达干扰后，A549细胞株的mRNA表达水平及细胞增殖变化。方法构建NSshRNA真核表达载体，转染A549细胞，G418筛选稳定表达细胞克隆，RT-PCR检测NS基因沉默，M

【作者】

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黄平高秀峰高鸿霞郑素平

【机构】

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四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室

【出处】

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西部医学

【发表日期】

：

2009年7期

【关键词】

：

核干细胞因子 RNA干扰真核表达载体肺癌细胞 NucleosteminRNA interference Eukaryotic expression vect

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目的探讨A549细胞株NS基因的表达干扰后，A549细胞株的mRNA表达水平及细胞增殖变化。方法构建NSshRNA真核表达载体，转染A549细胞，G418筛选稳定表达细胞克隆，RT-PCR检测NS基因沉默，MTT检测细胞增殖情况。结果构建的NSshRNA真核表达载体经菌落PCR和测序证实重组表达载体中插入序列与设计一致。RT-PCR检测显示构建的shRNA表达载体转染A549细胞后可显著降低NSmRNA的表达；M1vr结果显示干扰后细胞增殖速率明显减低。结论成功构建了一组针对NS基因的shRNA真核表达载

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