二氢黄酮醇4-还原酶（dihydroflavonol 4-reductase,DFR）是植物黄酮合成途径下游花青素合成的第一个关键酶,对于黄酮的合成调控和花青素的积累具有至关重要的作用。在前期研究中,我们以拟南芥At DFR基因为参考,发现了三个新的DFR家族成员,分别为GbDFR4、GbDFR5和GbDFR6,并对它们编码的蛋白功能进行了初步分析,但关于它们在植物抗逆反应和生长发育方面的功能尚不明确。本文的主要研究内容及结果如下:1、外源施加水杨酸（SA）、UV-B和Na Cl对银杏幼苗进行逆境胁迫,考察银杏总黄酮、花青素以及三个GbDFR基因表达的变化。结果显示三种外源因子均可对银杏总黄酮、花青素含量以及三个基因的表达产生影响,表明银杏可能通过改变GbDFR基因的表达来调节体内总黄酮和花青素的比例,从而使银杏能够更好地应对逆境胁迫。2、将叶盘转化法得到的三个GbDFR转基因烟草T1代进行功能验证,考察银杏DFR家族对烟草花青素合成积累的调控作用。结果显示,三个转基因烟草植株的花青素含量均高于野生型,花的颜色均比野生型深,证实GbDFR对花青素合成具有调控功能。3、利用southern blot实验对GbDFR6转基因植株进行独立株系验证。结果显示在获得的三个GbDFR6转基因烟草株系中有两个为独立株系。4、发现GbDFR6转基因烟草植株出现生长素相关的异常表型,对野生型和转基因型烟草的叶片、根、花、果荚、种子及植物全株形态比对。结果显示:GbDFR6转基因烟草表现出晚花、更高比例的扭曲叶片、更长主根更少侧根和大量胚发育异常的种子。初步推断该转基因烟草的生长素缺乏。5、以外源施加的方式给转基因烟草果荚补充生长素,同时通过给野生型烟草施加生长素运输抑制剂NPA的方式考查转基因烟草异常表型与生长素的关系。结果显示,外源施加生长素后转基因烟草异常发育的种子出现了部分恢复;而野生型烟草的果荚施加生长素运输抑制剂NPA后,则出现了与转基因烟草类似的表型,因此推测转基因烟草种子异常的原因可能为生长素运输异常。然而,进一步测定结果表明转基因和野生型烟草种子中生长素含量并没有明显区别,具体原因需要继续探究。综上所述,我们新发现的GbDFR家族的三个基因除了参与银杏抗逆反应过程中花青素和总黄酮的分配之外,可能还具有调节生长素运输的功能,从而造成转基因烟草的特殊表型。