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目的:通过观察右归丸及其拆方对氢化可的松法建立的肾阳虚大鼠肝线粒体能量代谢变化的影响,探讨右归丸“阴中求阳”机理在肾阳虚证能量代谢中所起的作用,解读右归丸“阴中求阳”治疗肾阳虚证能量代谢的作用机理,从能量代谢角度揭示“阴中求阳”法的生物学本质,同时也为温补肾阳中药在临床上的组方运用提供实验依据。方法:将56只SD大鼠（雄性,200±20g）适应性喂养1周后制备肾阳虚证大鼠,根据随机分组原则,8只为空白对照组,其余48只可分为模型组、右归丸组、滋阴组、补阳组,每组12只,采用氢化可的松背部皮下注射造模（25mg/Kg）。造模成功后,右归丸组、滋阴组、补阳组分别按生药10.26、6.21、4.05g/Kg剂量灌胃,1次/天,连续28天,灌胃体积均为7.5m L/Kg;空白对照组、模型组给予等体积生理盐水灌胃。1.在造模第15天测量空白对照组和模型组大鼠体质量及肛温;采用ELISA法分别测定空白对照组和模型组大鼠血清环磷酸腺苷（c AMP）含量、环磷酸鸟苷（c GMP）含量并计算c AMP/c GMP比值进行模型鉴定。2.末次给药后分别测量各组大鼠体质量及肛温,以观察各组大鼠体重增长情况和肛温变化。3.在灌胃结束后禁食12小时,大鼠麻醉状态下经下腔静脉采血,采用ELISA法分别测定各组大鼠血清c AMP、c GMP含量,计算c AMP/c GMP的比值。将肝组织分离,应用电镜观察肝组织线粒体结构;肝组织匀浆制备粗制线粒体,采用酶标法测定大鼠肝线粒体SDH、Na+-K+-ATP酶、CCO、LDH活性及ATP含量。结果:1.干预后各组大鼠肛温、体质量及c AMP/c GMP比值的变化与空白对照组比较,模型组肛温下降、体重显著下降、c AMP/c GMP比值降低（P<0.05或P<0.01）。与模型组相比较,右归丸组大鼠肛温升高、体重显著上升、c AMP/c GMP比值升高（P<0.01）;补阳组大鼠肛温变化不大（P>0.05）、体质量增长（P<0.05）,c AMP/c GMP比值升高（P<0.05）;滋阴组大鼠肛温、体质量、c AMP/c GMP比值变化不明显（P>0.05）。与空白对照组比较,右归丸组大鼠肛温有所恢复、体重近似正常水平、c AMP/c GMP比值变化不明显（P>0.05）,补阳组大鼠体质量较低,c AMP/c GMP比值降低（P<0.05或P<0.01）。2.干预后各组大鼠肝线粒体SDH活性变化与空白对照组相比,模型组SDH活性显著降低（P<0.01）。与模型组比较,滋阴组SDH活性变化不大（P>0.05）;补阳组和右归丸组SDH活性升高（P<0.05或P<0.01）。与空白对照组比较,补阳组和右归丸组SDH活性略低（P>0.05）。右归丸组与补阳组比较,SDH活性略高,但差异无统计学意义（P>0.05）。3.干预后各组大鼠肝线粒体Na+-K+-ATPase活性变化与空白对照组相比,模型组Na+-K+-ATPase活性显著降低（P<0.01）。与模型组相比,滋阴组、补阳组及右归丸组Na+-K+-ATPase活性显著升高（P<0.05或P<0.01）。与空白对照组比较,右归丸组Na+-K+-ATPase活性恢复正常水平（P>0.05）;滋阴组和补阳组Na+-K+-ATPase活性仍然处于较低水平（P<0.05或P<0.01）。4.干预后各组大鼠肝线粒体CCO活性变化与空白对照组相比,模型组CCO活性显著下降（P<0.01）。与模型组比较,滋阴组和补阳组CCO活性略高,但差异无统计学意义（P>0.05）。经右归丸干预后,与模型组比较,CCO活性显著升高（P<0.05）;与空白对照组比较,CCO活性略低,但差异无统计学意义（P>0.05）。5.干预后各组大鼠肝线粒体LDH活性变化与空白对照组相比,模型组LDH活性显著降低（P<0.01）。与模型组比较,滋阴组、补阳组及右归丸组LDH活性升高（P<0.05或P<0.01）。与空白对照组比较,补阳组和右归丸组LDH活性基本恢复正常水平（P>0.05）;滋阴组LDH活性仍然处于较低水平（P<0.05）。右归丸与补阳组比较,LDH活性略高,但差异无统计学意义（P>0.05）。6.干预后各组大鼠肝线粒体ATP含量变化与空白对照组相比,模型组ATP含量显著降低（P<0.01）。与模型组比较,滋阴组、补阳组及右归丸组ATP含量升高（P<0.05或P<0.01）。与空白对照组比较,滋阴组ATP含量仍然较低（P<0.05）;补阳组和右归丸组ATP含量基本恢复正常水平（P>0.05）。右归丸与补阳组比较,ATP含量略高,但差异无统计学意义（P>0.05）。7.干预后肝组织透射电镜的变化与空白对照组比较,模型组线粒体结构异常性变性,部分线粒体空泡样变性,甚至消失。与模型组比较,补阳组和滋阴组线粒体膜边缘恢复,脊数量增加,排列疏松,但较对照组,脊数量减少;右归丸组线粒体结构基本恢复,脊数量增加。结论:1.肾阳虚大鼠血清c AMP/c GMP的比值显著降低,肝线粒体SDH、Na+-K+-ATP酶、CCO、LDH活性及ATP含量均显著下降,肝线粒体超微结构损伤严重,存在线粒体能量代谢障碍,并出现机能减退、代谢减缓等一系列相关症状。2.肾阳虚大鼠经右归丸干预后血清c AMP/c GMP的比值上升显著;肝线粒体SDH、Na+-K+-ATP酶、CCO、LDH活性显著升高;肝线粒体内ATP含量水平明显恢复;肝线粒体超微结构的病理变化明显改善,能量代谢障碍及相关体征得以恢复。这可能是右归丸治疗肾阳虚证的作用机理,同时也是“阴中求阳”法的现代生物学实质之一,也为温补肾阳中药的组方运用提供了科学的实验依据。