【摘 要】
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目的:观察葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78,GRP78）在焦脱镁叶绿酸-α甲酯介导的光动力疗法（pyropheophorbide-αmethyl ester-mediated photodynamic therapy,MPPα-PDT）处理HOS细胞中的作用与机制。方法:HOS细胞用MPPα-PDT处理后,Flow cytometry检测细胞凋亡率,显微
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目的:观察葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78,GRP78）在焦脱镁叶绿酸-α甲酯介导的光动力疗法（pyropheophorbide-αmethyl ester-mediated photodynamic therapy,MPPα-PDT）处理HOS细胞中的作用与机制。方法:HOS细胞用MPPα-PDT处理后,Flow cytometry检测细胞凋亡率,显微镜观察细胞核形态及GRP78蛋白荧光强度。Western blot检测MPPα-PDT处理HOS细胞3、6、12和24 h后GRP78蛋白的表达。si RNA-GRP78成功转染HOS细胞后,分为Control组、si RNA-GRP78组、si RNA-GRP78+MPPα-PDT组及MPPα-PDT组,采用CCK-8法检测细胞增殖活性;Western blot检测细胞增殖相关蛋白（Ki67、PCNA）、凋亡相关蛋白（Cleaved-Caspase 3、Cleaved PARP）及Wnt/β-catenin通路蛋白的表达;流式细胞术检测细胞的凋亡率。荧光显微镜及流式细胞术分别检测细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）的表达。结果:MPPα-PDT 24 h组中HOS细胞核可见高亮蓝色以及核碎裂、固缩等细胞凋亡形态学变化,流式细胞术检测发现MPPα-PDT 24h组中凋亡率明显增高。细胞免疫荧光法检测MPPα-PDT组中GRP78蛋白平均荧光强度表达增高。si RNA-GRP78可有效抑制HOS细胞的m RNA及蛋白表达;成功转染后HOS细胞后,CCK-8显示细胞增殖活性下降;流式细胞术提示凋亡水平上升;HOS细胞增殖蛋白（PCNA、Ki67）表达下降（P<0.05）;凋亡相关蛋白（Cleaved-Caspase 3、Cleaved-PARP）表达水平上调（P<0.05）;Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达下降;流式细胞术及荧光显微镜均提示ROS水平增加。结论:MPPα-PDT可诱导HOS细胞凋亡及GRP78表达增加。si RNA-GRP78成功转染HOS细胞后,细胞增殖活性降低、凋亡水平增加;MPPα-PDT可进一步诱导HOS细胞凋亡,与抑制Wnt/β-catenin通路及ROS相关。
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下肢静脉曲张是最为常见的血管外科疾病之一,发病率可达30%[1]。下肢静脉曲张不仅仅是一个独立的疾病,也是一种可能由不同病因引起的临床表现。下肢静脉曲张早期表现为肢体酸胀不适、浅静脉迂曲成团,进展期可出现皮肤瘙痒、色素沉着、脂质硬化甚至皮肤溃疡。临床上常利用彩色多普勒超声（CUD）、计算机断层扫描静脉成像（CTV）、磁共振静脉成像（MRV）及数字减影血管造影（DSA）等影像学检查对下肢静脉曲张进行
目的:长链非编码RNA（Lnc RNAs）与多种人类癌症的进展密切相关。然而,Lnc RNA在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）中的确切分子机制尚不清楚。本研究探讨了Lnc RNA GK-IT1在ESCC中的表达,功能以及分子机制,为ESCC的治疗和诊断提供新的分子靶点。方法:应用肿瘤基因组图谱数据库（The Cancer Genome