【摘 要】
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根据基因银行中鸡贫血病毒(CAV)Cux-1株的序列,设计引物,以提取的CAV Cux-1和M9905株感染鸡的肝脏核酸为模板,经PCR技术分别扩增克隆了Cux-1株和M9905株的编码区基因序列.将
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根据基因银行中鸡贫血病毒(CAV)Cux-1株的序列,设计引物,以提取的CAV Cux-1和M9905株感染鸡的肝脏核酸为模板,经PCR技术分别扩增克隆了Cux-1株和M9905株的编码区基因序列.将克隆到的M9905株编码区基因序列测序后与已发表的Cux-1株相应序列进行比较后发现二者的差异很小,差异率仅为1.43﹪.根据测得的M9905株编码区序列又设计了两对用于扩增M9905株VP1编码区基因(ORF-3)和VP2编码区基因(ORF-1)的引物.经PCR扩增后,将扩增到的基因片段克隆并测序鉴定后构建了重组重粒pCI-vpl、pSI-vp2及pCISI-vp12.大量提取这三种质粒并分成三组,即pCI-vpl组,pCISI-vp12组及混合pCI-vpl和pSI-vp2组.将这三组质粒溶液各100ul(DNA浓度15ug/ul)分别于1日龄和16日龄两次分两点肌肉接种免疫雏鸡(每次50ul),并设pCI接种对照组和空白对照组,1月龄时攻以CAV强毒,结果表明三组免疫鸡均能抵抗强毒攻击,免疫组发病率明显低于pCI对照组和空白对照组,差异比较明显.
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