山羊抗猪脂肪细胞膜抗体的制备及特异性研究

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用不同的细胞破碎方法提取猪皮下、肾周脂肪细胞膜蛋白,10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果表明超声波细胞粉碎法效果最好,组织捣碎法次之,恒温磁力搅拌法最差,膜蛋白分子量为15kd-118kd。 9只山羊随机分为3组,每组3只,免疫脂肪细胞膜蛋白抗原。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组首免剂量分别为4.6ml(5mg),7ml(7.5mg),9.4ml(10mg),二免、三免分别为9.4ml(10mg),14ml(15mg),18.8ml(20mg),采集阳性血清,建立ELISA测定条件,并测定抗体效价。结果表明最高效价为1:5120。 分离提纯最高效价抗血清的IgG,进行种属、组织及部位特异性研究。结果表明脂肪细胞膜蛋白抗血清存在种属特异性、组织特异性及不明显的部位特异性。
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