【摘 要】
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目的用唾液酸化的路易斯寡糖-X（Sialvl lewis-X,sLeX）标记的超微顺磁性纳米氧化铁颗粒（Ultrasmall superparamagnetic iron oxide,USPIO）制成的光热诊疗剂USPIO-PEG-sLeX,探究其在裸鼠体内外的毒性大小、在体外的光热转化效果以及体内磁共振成像的研究。方法（1）培养和传代人鼻咽癌细胞株SUNE1-亚株5-8F细胞。（2）采用CCK8
【基金项目】
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项目名称:基于细胞粘附分子ELAM-1的双模态PET/MR分子成,像对鼻咽癌移植瘤转移的研究,项目合同编号:81760533,项目来源:国家自然科学基金,项目起止时间:2018年01月01日—2021年12月31日; 项目名称:基于ELAM-1基因表达的磁共振成像对鼻咽癌转移的研究,项目合同编号:81260334,项目来源:国家自然科学基金,项目起止时间:2013年01月—2016年12月; 项目
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目的用唾液酸化的路易斯寡糖-X（Sialvl lewis-X,sLeX）标记的超微顺磁性纳米氧化铁颗粒（Ultrasmall superparamagnetic iron oxide,USPIO）制成的光热诊疗剂USPIO-PEG-sLeX,探究其在裸鼠体内外的毒性大小、在体外的光热转化效果以及体内磁共振成像的研究。方法（1）培养和传代人鼻咽癌细胞株SUNE1-亚株5-8F细胞。（2）采用CCK8法检测光热诊疗剂USPIO-PEG-sLeX在体外对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）和5-8F细胞的细胞毒性。（3）将光热诊疗剂USPIO-PEG-sLeX经尾静脉注射入4～6周龄雌性Balb/c裸鼠体内,24小时后处死裸鼠且解剖取出裸鼠主要内脏器官,用10%福尔马林固定,行常规石蜡包埋、切片,并进行HE染色来检测光热诊疗剂在裸鼠体内的毒性。（4）使用4～6周龄雌性Balb/c裸鼠共30只进行右侧爪垫移植瘤模型造模。将接种5-8F肿瘤细胞8周后的裸鼠随机分成5组,一组6只,行常规麻醉,然后在尾静脉注射USPIO-PEG-sLeX前和注射后0h、1h、2h、4h、6h对5组裸鼠分别行3.0T磁共振T2*mapping扫描,对比分析注射前后各时间点T2*值。扫描完成后立即处死裸鼠并进行解剖,取出移植瘤标本放入10%福尔马林固定,行常规石蜡包埋、切片,对移植瘤切片行普鲁士蓝染色,用软件Image J测定平均光密度值（Mean optical density,MOD）来判断纳米氧化铁的聚集量,用免疫组化染色来分析移植瘤E-selectin的表达。（5）设置三组2m L的液体,分别为光热诊疗剂含量为1mg/m L、0.5mg/m L的溶液和蒸馏水,使用功率为1W、2W、4W的波长为808nm的近红外光对三组溶液分别为进行10分钟的照射,记录液体每分钟升高的温度,来判断光热诊疗剂的光热转化效率。结果（1）在用CCK-8法测试光热诊疗剂USPIO-PEG-sLeX的体外毒性实验中,即使在1mg/m L的最大浓度下,5-8F细胞和HUVEC细胞的活力仍然大于70%;在动物体内毒性实验中,裸鼠主要器官HE染色也未见明显的组织学改变和病理学损伤。（2）30只鼻咽癌爪垫移植瘤裸鼠模型均成瘤,成瘤率100%,普鲁士染色结果显示,磁性纳米氧化铁表现为癌细胞周围深浅不一蓝黑色颗粒;免疫组化染色结果显示,E-selectin表达呈强阳性,表现为癌细胞周围深浅不一的棕黄色包膜。（3）MOD值和T2*值经Pearson相关分析得出:相关系数r=-0.941,P=0.017,两者存在负相关关系。（4）体外光热转化的实验结果显示,在近红外功率不变的情况下,液体温度升高的速率随着光热诊疗剂浓度的升高而升高;随着功率的升高,三组液体温度的升高都变快,且含光热诊疗剂浓度高的液体比浓度低的温度升高快,含有光热诊疗剂的液体比蒸馏水升温快。结论光热诊疗剂USPIO-PEG-sLeX的生物毒性低,具有良好的靶向性,且稳定性良好,光热转化效率高,有望为成为鼻咽癌诊断和治疗的一种理想纳米材料。
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